CygnusVeroCellHCPELISAKitVero细胞HCP试剂盒检测原理：  

VeroCell检测是一个双位点酶联免疫检测。样本中包含的VeroCellHCPs蛋白与标记有抗-VeroCell抗体的辣根过氧化物酶同时反应，反应发生在之前涂有一层吸附性抗-VeroCell蛋白抗体的微量滴定板中进行。免疫反构成为夹层式结构：固相抗休-HCP-酶标记抗体。反应结束后清洗微量滴定板去除未结合反应物。添加TMB作用底物反应。微量滴定板读数器上测定水解物浓度，水解物浓度与VeroCellHCPs蛋白浓度成比例。用提供的标准液绘制标准曲线，根据读数可以计算出VeroCellHCPs蛋白含量。  

检测过程：  

取出所有试剂平衡到室温→分别移取50µl标准液，对照物和样品至待测孔→移取100µlanti-VeroCell:HRP（#F501）至每孔→密封滴定板，摇床室温温育2小时，180rpm→清空小孔，用纸吸干残留液，350µl清洗缓冲液清洗4次→加100µlTMB作用物（#F005）→室温静置30分钟，不需摇床→加100µl反应终止液（#F006）→分光光度计450/650nm读数  

结果分析：  

标准液（0,2,8,25,75,200ng/mL）可用于制作标准曲线，标准液浓度相当于免疫反应HCP总浓度。根据测定的小孔中标准液吸光值绘制标准曲线。数据分析可以使用计算机选配曲线，例如点到点，三次样本函数，或四参数逻辑曲线。不要使用线性回归分析修改样品吸光值，这样会出现显著误差。也可以手工绘图，Y轴标注吸光值，X轴标注浓度。然后根据样品吸光值计算出样品中HCP浓度。（操作时每一浓度标准液都要滴定到两个小孔中，以便计算平均分光光度值，样品也需计算平均吸光值）。