HPLC色谱柱常见疑难解答(1)
时间:2014-08-23 阅读:1788
请问:我的柱压为什么一直很高?每天做完后我用于5%的甲醇0.2ml/min冲过液,第二天用甲醇冲30min后再进行工作。
答:柱压过高是HPLC柱用户zui常碰到的问题。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,我建议你可按下面步骤检查问题的起因。
1、拆去保护柱(哪个是保护柱?),看柱压是否还高,否则是保护柱的问题,若柱压仍高,再检查;
2、把色谱柱从仪器上取下,看压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查。
3、将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入检测器)。这时,如果柱压仍不下降,再检查;
4、更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明你的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高,请与柱子厂商。一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。
我看到你用5%的甲醇0.2ml/min冲过液,虽然流速很低,但你的水相占比例大,对柱子的寿命不好,不知道你的是长柱还是短柱,柱压有多高?请告知!