默克色谱柱的使用方法
时间:2022-07-26 阅读:1482
默克色谱柱没有特殊说明,它是评估报告中显示的流动相,使用前,请务必注意液相色谱柱的存储溶液是否与要分析的样品的流动相混溶。在反相色谱中,如果使用高浓度盐或缓冲液作为洗脱液,则应使用约10%的低浓度有机相洗脱液进行过渡,否则缓冲液中的盐将处于高浓度有机相。容易沉淀和阻塞色谱柱。如果要选择合适的列,则需要了解它的分类和内在属性,那么默克色谱柱的使用方法是什么呢?
1、获得默克色谱柱后,请先阅读说明以了解该柱的具体性能:温度耐受性,pH耐受性等。以及色谱柱的洗涤和储存条件。色谱柱校准测试确认色谱柱本身没有问题后,即可正常使用。
2、对样品进行充分的预处理,以确保样品的清洁度;使用保护柱或在线过滤器,并根据实际情况更换保护柱或过滤器。
3、避免突然的压力和温度变化以及任何机械振动。
4、溶剂的组成应逐渐改变,尤其是在反相色谱中在流动相中使用缓冲盐时,应避免盐析。
5、选择合适的流动相(尤其是PH),以避免损坏固定相,在低pH下共价键断裂以及键和相水解;高pH下的硅胶溶解。
6、在使用默克色谱柱的过程中,如果压力升高或发生污染,请选择适当的冲洗或反冲洗条件。
适用于氨基色谱柱和氰基色谱柱
常规清洁:乙腈:水=60:40,以冲洗色谱柱。不建议在清洁过程中水相比率超过40%。水相的过量使用将容易导致键和相的水解。
色谱柱再生:长时间使用色谱柱并且降低了色谱柱校准量后,可以再生色谱柱。乙腈:水(水中0.05%氨水)=60:40的条件,并冲洗30倍柱体积。
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色谱柱可分为填充柱和开管柱,由多金属玻璃制成或制成。有直管形、盘管形、U形管等形状。填充柱通常用于液相色谱,色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。色谱是分离分析的手段,分离是核心。因此,负责分离的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱的要求是柱效高、选择性好、分析速度快。各种市售的HPLC颗粒填料,如多孔硅胶和基于硅胶的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,粒径为3、5、7、10μM,柱效理论值可达50000~160000/m。一般分析只要求5000塔板的柱效;同源分析,只要500;对于较难分离的物料对,最多可使用20000根柱子,因此10~30cm左右的柱长可以满足复杂混合物分析的需要。