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好物分享—Cy系列荧光染料

时间:2023-08-11      阅读:830

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Cy为花菁(Cyanine)的缩写,也叫菁染料。经典的菁染料含有两个含氮杂环,分子内部含有由甲川基(CH)n组成的共轭链,n可为奇数/偶数。Cy系列荧光染料常被用于蛋白、抗体以及小分子化合物的标记。

本文着重分享了不同Cy染料的特点和应用,欢迎大家关注收藏~~


Cy概述与产品说明


Cyanine(Cy)系列染料是具有多聚次甲基桥链化学结构特点的一类荧光染料。Cy染料的次甲基桥链(1-7个次甲基)两端常常连着两个氮原子,其中一个氮原子带正电,从而Cy染料形成具有离域正电荷效应的介离子化合物。因为这个结构特点,Cy染料的消光系数ε非常高。桥链长度和两端的发色团直接控制着染料的吸收峰和发射峰值,从而让Cy系列染料可以覆盖从紫外到远红外的几乎所有常用荧光谱带。




本文主要讨论用于生物标记的Cy染料,它们都有两个对称的indolenine发色团。这种构架让Cy染料的非特异性吸附少,消光系数ε高,荧光量子产率高,从而使其具有背景弱,信号强的优势。在细胞荧光标记中,Cy染料常常取代FITC,FAM和罗丹明等荧光染料。同时,Cy系列荧光染料也常用于生物筛选,蛋白免疫印迹,生物医学显影,小动物体内成像等。


【Cy与Sulfo-Cy】


一般的,Cy系列荧光染料包含两种异构体的形式,一种是非磺化花青素(non-sulfonated cyanines),一种是磺化花青素(sulfonated cyanine)。

非磺化Cy染料的水溶性通常比较低。在标记生物分子时,常常需要加入有机溶液(一般是DMF或DMSO)。常规操作是将染料先溶于有机溶剂中,然后按比例加入到生物分子的水溶液中反应。反应完成后离心除去沉淀的染料,再透析除去未反应的染料小分子。非磺化Cy染料易溶于氯仿,甲醇,THF,乙腈等常规有机溶剂,适用于有机合成反应。因此,非磺化Cy染料可以直接在有机溶剂中与有机小分子反应,标记小分子或者高分子材料。

磺化Cy染料在其发色团上各有两个硫酸离子官能团,所以这类染料具有非常好的水溶性。在对样品水溶性要求较高时,磺化Cy染料是更好的选择。磺化后,Cy染料的荧光谱图发生了非常小的蓝移,这是一个非常普遍的现象,蓝移后激发峰和发射峰仍在仪器的检测范围之内,所以不必更改仪器参数。因此,Cy与Sulfo-Cy具有相同的骨架结构,光谱性质几乎一致,在大多数情况下可以交换使用。

Cy free acid系列是一类含有游离的、未活化的单官能团羧酸,其中Cy free acid是非水溶性形式,Sulfo-Cy free acid是磺酸化的高水溶性形式。在多数情况下,该系列染料不具有反应活性,适用于样品对照或仪器校准。

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【Cy SE与Sulfo-Cy SE】


Cy SE是非水溶性形式的染料,Sulfo-Cy SE是磺酸化的高水溶性形式染料,被广泛用于标记肽、蛋白质和寡聚体等生物分子。Cy系列染料除了用于标记生物分子外,也常被用于动物活体成像。由于细胞和组织的自发荧光在近红外波段小,而近红外光在生物组织中的穿透深度较大,因此在检测复杂生物系统时,Cy系列染料能提供更高的特异性和灵敏度。同时,Cy系列染料还拥有紫外光区染料和同位素标记无法具备的生物安全性,有利于在活体生物中监测标记分子的分布。

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【DBCO-Cy】


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菁染料衍生物氮杂二苯并环辛(DBCO)是一种通用的标记试剂,常用于检测含有叠氮化物的分子或化合物。环辛烯类化合物可用于促进无铜叠氮炔环加成反应。这种二苯并环辛烯将与含叠氮官能团的化合物或生物分子反应,不需要Cu2+催化剂即可产生稳定的三唑键。由于不含金属离子催化剂,所以不会造成细胞毒性,适合生物正交化学或生物正交点击化学的活体应用。此外,与传统的DBCO-Cy3和DBCO-Cy5相比,DBCO-Cy3-3和DBCO-Cy5-3水溶性更好。

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应用范围

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产品货号

产品名称

IC8640

Preactivated PE-Cy5

Maleimide

IC8810

Preactivated APC-Cy5.5

Maleimide

IC8820

Preactivated PE-Cy5.5

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