青链霉素混合液的特点及制备
时间:2015-12-30 阅读:2450
青链霉素混合液又称双抗,是专门用于细胞培养的,可以直接添加到细胞培养液内。青霉素-链霉素溶液(100X)中,青霉素的含量为10000U/ml,链霉素的含量为10mg/ml。在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml。双抗起的作用为抗生素、抑制细菌生长、避免细胞污染。
青链霉素混合液的制备
用20mL空针抽16毫升三蒸水(或PBS),溶160万单位/瓶的青霉素G钠一支,过滤除菌;用10mL空针抽10毫升三蒸水(或PBS),溶一支100万单位/瓶的硫酸链霉素一支,过滤除菌。分装EP管中,-20度保存。使用前每100m培养液加双抗各100ul-150u即可。细胞培养液双抗浓度:青霉素G钠,100-1000U/ml;硫酸链霉素,100-1000μg/ml(100万单位=1g)。
试验中常见问题
1、细胞培养中加的双抗的浓度是多少?
一般细胞培养都是买的双抗储存液吧,上面会写着X100 就是稀释100倍加入培养液呗,比如500ml培养液,加50mlFBS,5ml双抗
.2、细胞培养中加的双抗有什么作用?
抗生素:常用的是青链霉素,俗称“双抗溶液”。青霉素主要是对革兰阳性菌有效,链霉素主要对格兰阴性菌有效。加入这两种抗生素可预防绝大多数细菌污染。双抗对细菌有用,加入培养基一周有效,之后失活,起到一点预防细菌污染的作用,如果培养条件好,可以不加。建议药物实验不加双抗,因为它对细胞形态、代谢还是有一点影响。
青链霉素混合液为索莱宝常备货产品,货号为P1400。索莱宝所售青链霉素混合液(100X) (Penicillin-Streptomycin Solution, 100X)用于预防细胞培养的细菌污染,特别是革兰氏阳性和阴性细菌的污染。产品经过滤除菌处理,可以直接添加到细胞培养液内。