标本处理的几个常见问题
时间:2016-02-19 阅读:3358
组织标本处理的步骤:取材、固定、脱水、包埋、切片、染色-HE
组织标本的处理是简单基本的工作程序,看起来简单,认真做起来会有很多问题;
1、 取材的问题:厚度:3mm,大小:2x1.5cm;过厚过大固定不透,脱水不透,影响切片染色。
2、 固定液:常用福尔马林,如果标本做免疫组化等其他实验,用中性福尔马林固定更好;
3、 固定液体量:要与标本容积比:1:9;不可将同一动物的内脏放置在一个容器(常用的是试管),固定不透,夏天会发生腐败细胞坏死自溶,不能区分是毒性作用所致还是温度高所致。
4、 固定时间:小标本4-6H,大标本18-24H;固定时间不能过长,经常有实验室为了不同批动物,一起做后续实验,把先前的标本放置在固定液中,以为固定了就行,做HE染色尚可,但会影响蛋白活性表达,做免疫组化等其他实验,将会影响结果;因此,不能过长时间固定,对标本脱水包埋处理,包埋成蜡块后,保存时间可以很长。
5、 特殊标本处理:骨骼要脱钙处理,动物皮毛要去除,而且,要在活体时去毛。否则,动物的毛发将影响后续染色观察。