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阿斯巴甜可能致癌?如何测定?

时间:2023-07-24      阅读:1195

近期,“阿斯巴甜致癌”争议引起广泛关注。国际癌症研究机构、联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会近日发布报告,将阿斯巴甜归为“可能对人类致癌”(2B类致癌物)之列。

 

阿斯巴甜是国际食品法典委员会(CAC)及中国、美国、欧盟等批准合法使用的食品添加剂。CAC批准阿斯巴甜可用于冷冻饮品、口香糖、糖果、焙烤食品、水产品、调味品、碳酸饮料等,规定最大使用量为0.3g/kg——10.0g/kg。

 

基于标准要求,可使用悟空K2025高效液相色谱仪测定阿斯巴甜含量。

 

实验原理

 

 

K2025高效液相色谱仪

 

 

与阿斯巴甜同属人工合成的二肽类甜味剂的阿力甜,也是人们常用的甜味剂。阿斯巴甜的甜度可达蔗糖的200倍,阿力甜可达蔗糖甜度的2000倍。

 

此实验,我们用高效液相色谱法,使用悟空K2025高效液相色谱仪测定饮料中两者的含量。

 

试样中的阿斯巴甜、阿力甜在200 nm处有紫外吸收,经高效液相色谱测定,外标法定量。

 

实验方案

 

色谱条件

悟空K2025高效液相色谱仪:K2025 P2二元高压输液泵、K2025 AS自动进样器、K2025 CO柱温箱、K2025 UVD紫外-可见光检测器、Wookinglab色谱工作站;

 

色谱柱:C18色谱柱,4.6×250 mm,5 μm或者相当的色谱柱;

流动相:乙腈 - 水(20+80);

流速:0.8 mL/min;

进样量:20 μL;

柱温:30℃;

检测器及波长:紫外-可见光检测器,检测波长为200 nm。

 

重复性测试

按照色谱条件进行采集,混合标准溶液(阿斯巴甜和阿力甜浓度均为5 μg/mL)的色谱图如图1所示,积分结果如表1所示。

图片

图1混合标准溶液(浓度均为5 μg/mL)的色谱图

 

表1 混合标准溶液(浓度均为5 μg/mL)色谱图积分结果

目标物

阿斯巴甜

阿力甜

保留时间

(min)

7.225

11.158

峰面积

(mAU.s)

387.572

222.461

峰高

(mAU)

39.370

14.850

理论塔板数

12959

12977

分离度

-

12.19

对称/拖尾因子

1.18

1.08

 

由表1中数据可知,阿斯巴甜的理论塔板数为12959,拖尾因子为1.18;阿力甜的理论塔板数为12977,拖尾因子为1.08。

 

将混合标准溶液(浓度均为5 μg/mL)连续进样7针,叠加的色谱图如图2所示,结果见表2。

图片

图2 混合标准溶液(浓度均为5μg/mL)连续进样7针叠加的色谱图

 

表2 混合标准溶液(浓度均为5μg/mL)连续进样7针重复性数据统计

目标物

阿斯巴甜

阿力甜

 

保留时间

峰面积

保留时间

峰面积

1

7.225

387.572

11.158

222.461

2

7.208

387.416

11.133

222.368

3

7.217

386.782

11.142

221.505

4

7.217

387.468

11.133

222.415

5

7.225

387.013

11.150

222.610

6

7.225

386.430

11.150

222.238

7

7.217

386.083

11.150

222.631

平均值

7.219

386.966

11.145

222.318

RSD%

0.088

0.146

0.085

0.173

 

由表2中数据可知,混合标准溶液(浓度均为5 μg/mL)连续进样7针重复性测试,阿斯巴甜保留时间的RSD为0.088%,峰面积的RSD为0.146%,阿力甜保留时间的RSD为0.085%,峰面积的RSD为0.173%,均具有良好的定性定量重复性。

 

含量测定

 

校准曲线

 

按照色谱条件进行采集,将混合标准系列溶液上机测定,混合标准系列溶液叠加的色谱图如图3所示。

图片

图3 混合标准系列溶液叠加色谱图

 

阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均呈现良好的线性关系,确定系数R2均在0.9999以上。

 

含量测定

 

按照步骤对饮料样品进行处理,并进行加标回收实验。空白溶液的色谱图、样品的色谱图及样品加标的色谱图如图4~图6所示。

图片

图4空白的色谱图

 

图片

图5 样品的色谱图

 

图片

图6 样品加标的色谱图

 

经计算,样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜,加标回收率分别为102.6%和98.6%。

 

 

结论


通过对阿斯巴甜、阿力甜的理论塔板数、重复性、灵敏度、线性的测试以及对样品中阿斯巴甜和阿力甜的含量进行测定,实验结果表明:

 

阿斯巴甜的理论塔板数为12959,拖尾因子为1.18;阿力甜的理论塔板数为12977,拖尾因子为1.08,均有良好的峰型;混合标准溶液连续进样7针重复性测试,阿斯巴甜保留时间的RSD为0.088%,峰面积的RSD为0.146%,阿力甜保留时间的RSD为0.085%,峰面积的RSD为0.173%,均具有良好的定性定量重复性;

 

灵敏度测试中,阿斯巴甜的仪器检出限为7.229 ng/mL,仪器定量限为24.095 ng/mL;阿力甜的仪器检出限为19.771 ng/mL,仪器定量限为65.902 ng/mL;阿斯巴甜、阿力甜在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,确定系数R2均大于0.9999;对样品进行测试,样品中未检出阿斯巴甜及阿力甜,加标回收率分别为102.6%和98.6%。

 

因此,Wooking K2025可以满足《GB 5009.263-2016 食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》中阿斯巴甜和阿力甜含量测定的需求。

 

关于甜味剂是否会损害健康的争议从未停止。但“合理适量”是永远的重点。

 

国家食品安全风险评估中心回应:阿斯巴甜按照我国现行标准规范使用可以保障安全,将继续关注并通过严谨的标准和严格的监管,确保食品安全的底线。

 

抛开剂量谈危害是不科学的,虽然阿斯巴甜并没有那么可怕,但我们仍要注意绝不能无限摄入。

 

 

 

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