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食品中细菌的提取 -沙门氏菌的检测

时间:2019-01-24      阅读:795

一、沙门氏菌检测
沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜不同形式的总称。沙门氏菌的病原体。属肠菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种(或菌株)。按其抗原成分,可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。

实验过程
1、称取25g(mL)样品放入盛放有225mL缓冲蛋白胨水(BPW)的无菌拍打均质袋中,用拍打式均质器拍打1min-2min。如需调整pH值,用1mol/L无菌NaOH或HCL调pH至6.8±0.2
2、使用均质袋,可直接进行培养于36℃±1℃,培养8h~18h
3、轻轻摇晃培养过的样品混合物,取1mlL(可使用SOCOREX稀释移液器),转种于10mL亚酸盐胱氨酸増菌液SC内,于36℃±1℃培养18h~24h。同时取1mL,转种于10mLTTB内,于42℃±1℃培养
4、分别用接种环取增菌液1环,划线接种于一个BS琼脂平板于36℃±1℃培养40h~48h和一个HE琼脂平板于36℃±1℃分别培养18h~24h观察各个平板上生长的菌落

各个平板上生长的菌落
* BS琼脂 菌落为黑色有金属光泽、棕褐色 或灰色,菌落周围培养基可呈黑色或棕色;
* HE琼脂 蓝绿色或蓝色,多数菌落中心黑色或几乎黑色;有些菌株为黄色,中心黑色或几乎全黑色
* XLD 琼脂 菌落呈粉红色,或带不带黑色中心,有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心,或呈现全部黑色的菌落;有些菌株为黑色菌落,带或不带黑色中心鉴定  采用的试剂进行鉴定。

二、拍打式均质器和稀释移液器
1、wiggens拍打式均质器


* 细菌萃取,经过拍打式均质后细菌没被破坏
* 超级舒适。容易插入均质袋, 在均质结束时,叶片并排停靠。密封系统防止液    体从均质袋顶部溢出
* 钢化玻璃制可视窗,易于观察(W 型)
* 工作时间1s-9min59s可调,或者选择连续工作模式免维护
* 无碳刷电机


2、socorex稀释移液器


移液器的金属吸嘴可以安装细而长的麦管吸头,所以该移液器可以从细长的容器中取样 ( 如拍打均质器的样品袋 )在细菌学的研究中,该移液器经常用来替代刻度玻璃移液管进行1:10稀释样品研究。

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