细胞培养的污染有哪些类型
时间:2022-08-10 阅读:654
生物污染的主要类型:
1
细菌污染
检测:在被感染后的几天内,通过肉眼检查培养物很容易检测到细菌污染;受感染的培养物通常出现浑浊(即浑浊),有时表面有一层薄膜。培养基的 pH 值突然下降也经常遇到。在低倍显微镜下,细菌表现为细胞间微小的移动颗粒,在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。
2
霉菌污染
检测:与酵母菌污染类似,培养物的 pH 值在污染的初始阶段保持稳定,然后随着培养物受到更严重的感染并变得浑浊而迅速增加。在显微镜下,菌丝体通常表现为细丝状,有时表现为更密集的孢子团。许多霉菌物种的孢子在其休眠阶段可以在极其恶劣和不适宜居住的环境中生存,只有在遇到合适的生长条件时才会被激活。
3
病毒污染
检测:细胞培养物的病毒感染可以通过电子显微镜、使用一组抗体的免疫染色、ELISA 测定或使用适当病毒引物的 PCR扩增来检测。
4
支原体污染
一些生长缓慢的支原体可能会在培养物中持续存在而不会导致细胞死亡,但它们可以改变培养物中宿主细胞的行为和新陈代谢。
检测:慢性支原体感染可能表现为细胞增殖率降低、饱和密度降低和悬浮培养中的凝集;然而,可靠的检测支原体污染的方法是定期使用荧光染色(例如,Hoechst 33258)、ELISA、PCR、免疫染色、放射自显影或微生物测定对培养物进行检测。
5
酵母菌污染
检测:与细菌污染一样,被酵母菌污染的培养物会变得浑浊,尤其是当污染处于晚期时。被酵母菌污染的培养物的 pH 值几乎没有变化,直到污染变得严重,在此阶段 pH 值通常会增加。在显微镜下,酵母表现为单个卵形或球形颗粒。