特色方案｜食品中维生素B12的测定
时间：2023-07-07 阅读：420
特色方案
食品中维生素B12的测定
维生素B12又叫钴胺素，是含有必须矿物质的维生素，广泛存在于动物食品中。维生素B12参与制造骨髓红细胞，具有防止恶性贫血的作用。消化道疾病者容易缺乏维生素B12，应当注意饮食平衡，并适当口服维生素B12予以补充。SHIMSEN 维生素B12免疫亲和柱能够特异地富集样品中的维生素B12，广泛应用于乳制品、婴儿配方奶粉及饮料等食品样品的前处理步骤。
1. 提取
维生素B12标准品：
380-04112-S，Vitamin B12
维生素B12同位素内标：
380-04412-IS，[13C7]-Vitamin B12
准确称取混合均匀的样品2.0 g（精确至0.01g）于50 mL离心管中，加入20 mL去离子水溶液，涡旋10 min，
超声15 min。于8000 r/min下离心10 min，移取4 mL上清液，待净化。
2. 净化
SHIMSEN 维生素B12免疫亲和柱，1000ng/3mL（货号：380-00930-03）
（1）活化：加压排出免疫亲和柱中的保护液，弃去流出液；
（2）上样：准确移取上清液4 mL加入免疫亲和柱中，弃去流出液；
（3）清洗：当上样液的液面下降到免疫亲和柱中的管体处时（未全流干时），向柱中加入10 mL水，弃去流出液，于负压装置（货号：RT-26077）中将小柱抽干；
（4）洗脱：关闭负压装置阀门，向柱中加入2 mL甲醇，静置2-3 min，打开阀门，收集流出液。
（5）重新溶解：向洗脱液中加入50 µL 0.1%甲酸水，于50-60℃氮吹至近干；再加入1 mL 0.1%甲酸水涡旋混匀，过0.22 µm尼龙滤膜（货号：380-00321），待检测。
注意：
① 实验中应控制柱流速不要超过1 mL/min；
② 免疫亲和柱于2-8 ℃储存，不可冷冻，使用前需要恢复到室温。
附：参考方法
食品中维生素B12的测定 参考标准GB 5009.285-2022 第二法
