内毒素ELISA试剂盒 注意哪些事项呢?

●分子实验中常用生化试剂原理汇总● 1．溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。 EDTA：（1）螯合Mg2＋、Ca2＋等金属离子，抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用（DNase作用时需要一定的金属离子作辅基）;（2）EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。 2．NaOH－SDS液： NaOH：核酸在pH大于5，小于9的溶液中，是稳定的。但当pH＞12或pH＜3时，就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1／L，加抽提液时，该系统的pH就高达12.6，因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。 SDS：SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有：（1）溶解细胞膜上的脂质与蛋白，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜。（2）解聚细胞中的核蛋白。（3）SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能抑制核糖核酸酶的作用，所以在以后的提取过程中，必须把它去除干净，防止在下一步操作中（用RNase去除RNA时）受到干扰。 3. 3mol／L NaAc（pH4.8）溶液： NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至4.8，必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性，使变性的质粒DNA能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol／L NaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相聚合，后者是因为钠盐与SDS－蛋白复合物作用后，能形成较小的钠盐形式复合物，使沉淀更*。 4．为什么用无水乙醇沉淀DNA？用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的终含量占67％左右。因而也可改用95％乙醇来替代无水乙醇（因为无水乙醇的价格远远比95％乙醇昂贵）。但是加95％的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大，尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95％乙醇代替无水乙酵，后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15－30分钟即可。

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内毒素ELISA试剂盒

检测范围：欢迎QQ或电话索取原版说明书.
产品规格：96T/48T。
主要成分：酶标板,试剂,标准品等
经营种类：进口分装和原装、国产
性状：盒装液体
试剂盒保存：2-8℃低温保存。
标本：血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期应用：ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

人胚胎肠粘膜组织来源细胞

选购要点：一、经济性对于选择进口品牌的试剂盒还是国产品牌的试剂盒，可以根据实验室课题经费以及各品牌的产品质量和美誉度来自行选择。一般质量可靠，文献引用多。建议大家通过阅读SCI文献，了解同行所使用的品牌。但品牌由于进口和运输等成本较高，因此售价也较高。 二、美誉度不论选择品牌还是国产品牌时，都要注意产品的质量、度和美誉度。不是说所有的国外品牌质量都可靠，有些品牌其实是OEM贴牌的，质量不一定有保障。还有一些公司提供的试剂盒，就更不靠谱了，相关指标的抗体，找遍都没有，如何开发出相应的ELISA试剂盒呢？ 所以对于新手而言，一定要谨慎选择。 三、灵敏度和检测范围灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的zui低限，用户可根据自己样本中待检指标的量选择合适的试剂盒，如果待检指标水平很低，一般的试剂盒不能满足要求，可选择高敏的ELISA试剂盒。如果待检指标的浓度高于试剂盒标准曲线的zui高值，则需要适当倍数稀释样本，计算结果时，乘以相应的系数倍数即可，如果样本中待检指标含量较低，一般不建议再做稀释。 四、重复性科学实验讲求重复性，一般ELISA试剂盒，其板内和板间变异系数应该控制在15%以内。在选择试剂盒时，要通过阅读相应的说明书或电话咨询厂家试剂盒的相关技术参数。 五、试剂盒特异性 ELISA试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分--抗体对有关，若抗体对中之一为多抗，另一个必须为单抗，建议使用双单抗。在选择市面上的试剂盒时，先阅读相关产品的说明书，了解试剂盒的特异性和交叉反应性。 六、文献引用选ELISA试剂盒时，SCI文献的引用有参考价值。这也是业界对产品认可的一个非常重要的指标。重尤其选择国内品牌时，一定要多了解下该品牌的文献引用情况以及在业内的口碑。大家可以在Google scholar 里检验下。也可以到一些行业论坛上去了解相关品牌的信息，如丁香通、小木虫等。

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编辑：小檀20181019