血管内皮细胞作为调控止血、血栓形成和炎症等sheng理过程的体内屏障，其发挥作用的重要机制之一是Weibel Palade小体（WP小体）的分泌。WP小体是血管内皮细胞中的重要囊泡，其中包含多种凝血和炎症相关因子，如vonWillebrand因子（VWF）等。北京大学分子医学研究所罗金才教授团队在内皮细胞分泌调控血管稳态机制研究方面取得新的进展，相关研究成果以“Myosin IIa is Critical for cAMP-mediated Endothelial Secretion of von Willebrand Factor”（MyosinIIa在cAMP介导血管内皮细胞分泌VWF过程中的关键作用）为题，于2018年2月8日在《血液》（Blood）杂志上在线发表。疱疹病毒单抗杂交瘤细胞，上海乾思 生物公司细胞近3000种，来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制，在中国大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。为您提供疱疹病毒单抗杂交瘤细胞外，还有更多相关实验产品，标准品，细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。

　　1. 疱疹病毒单抗杂交瘤细胞液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？

　　要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中，通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

　　2.疱疹病毒单抗杂交瘤细胞 液体培养基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。

　　几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20 ?C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度（100倍）的谷氨酰胺溶液（1ml/支）。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培养基中，其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色，-24?C保存。

　　3. 疱疹病毒单抗杂交瘤细胞 培养用液pH对细胞生长的影响

　　由于，大多数细胞适宜pH为7.2~7.4，偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不*相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。

　　但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些，偏酸环境中更利于细胞生长。因此，我们在配制培养用液时，可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时，溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

　　4.疱疹病毒单抗杂交瘤细胞 细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗？

　　不见得！因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为：

　　（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；

　　（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。

　　（3）0.25% 胰蛋白酶

　　溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。

　　多数细胞传代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ这种消化液。

　　购买上海乾思 生物细胞注意事项（乾思 生物）发布

　　一、客户收到细胞先不开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议受收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；

　　收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。

　　二、如为贴壁细胞，请在显微镜下观察细胞密度：

　　1. 未超过80%汇合度时，用75%酒精（建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水，喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作；然后打开盖子，先把培养基吸出10ml左右，放在离心管里，然后瓶口过火（严禁直接倾倒），这样可以保证不污染，再用10ml的移液管，将剩余的培液全部吸出，放于离心管中，培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整）之后，传代或者冻存。

　　2. 超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下：

　　1) 弃去培养液，用3ml PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于T25培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来；

　　3) 加入6-8ml*培养基，吸出，分到新的培养瓶中，按要求分瓶。

　　三、如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心5分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

　　注意：换液时一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

　　四、细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

　　（1）细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、破损、漏液等，重发；

　　（2）冻存的细胞复苏后，绝大多数细胞未存活，重发；

　　（3）存活的细胞静置24小时后，绝大多数细胞未存活，重发；

　　（4）冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封，出现污染，重发；

　　（5）视具体情况而定。

　　五、细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

　　（1）客户造成细胞污染，不重发；

　　（2）客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

　　（3）细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

　　（4）细胞培养时经其它处理的，不重发；

　　（5）细胞收到2天内，未告知，不重发；

　　（6）视具体情况而定。

　　六、售后服务政策

　　Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分产品现货，超低比价，另常备  Trizol  DMSO  lipo2000    lipo3000  SC-2004  SC-2005常备现货 ；货期短，价格优，售后齐全。

　　细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果；细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，我们调查核实后予免费调换，不收取任何费用。

　　需要客户提供疱疹病毒单抗杂交瘤细胞细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表。

　　如用户收到细胞8-30天之内，因处理不当造成细胞死亡或污染，我公司将优惠价重新提供一株原细胞

　　疱疹病毒单抗杂交瘤细胞质量可靠，售后有保障

　　★我库细胞近3000种，来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制。

　　冻存细胞时间为5-7个工作日，活细胞为7-15个工作日。

　　★由于细胞库现有细胞类目多，为了不出现混乱错误，需要了解疱疹病毒单抗杂交瘤细胞相关细胞价格及详细资料请老师，对您造成的不便还请见谅！

（编辑：tanxi）