ACE C18-PFP色谱柱介绍Ⅶ - UV和LC/MS兼容性的低流失
时间:2019-04-02 阅读:1175
许多相显示有键合相的流失,当基线稳定性受到影响时,这可以在梯度条件下被清晰地观察到。
尽管大多数超纯C18相可以预期产生低柱流失,但是需要谨慎选择替代选择性的键合相,以确保在低UV波长或LC/MS下进行分析时柱流失不会引起不可预见的问题。
需要注意的是,色谱柱的流失取决于许多因素,并且可能会随时间和系统而变化。
因此,在比较色谱柱流失时,必须在受控条件下进行。
本实例对超纯ACE C18色谱柱(顶部)的低流失特性与PFP色谱柱(中间)的高流失特性进行了比较。
ACE C18-PFP色谱柱(底部)显示其流失水平与ACE C18相当,尽管后者包含可以提供替代选择性的完整PFP官能团。
UV流失的比较
在相同条件下对更宽范围的色谱柱的进一步分析证实,刢先的高纯度C18柱品牌显示出相似的低水平色谱柱流失。
然而,传统上推荐改变选择性的替代键合相(即苯基,极性嵌入式,PFP表面化学物质)的评估显示,所有这些非C18色谱柱均有显著更高的流失。
ACE C18-PFP将低流失水平(典型的刢先C18色谱柱品牌)与替代选择性相结合,从而为分析者提供了有价值的方法开发工具。
当采用MS检测时,非C18相给分析者带来了传统上使用所出现的额外挑战。
在情况下,柱流失可能会污染检测器信号并掩盖重要分析物。
在以下实例中,在梯度运行的8-10分钟时段中监测柱流失,此时有机物的百分比增加至其大水平,因此柱流失也是高的。
MS Spectra(左边系列)提供了在该8-10分钟窗口中检测到流失的m/z裂解,而总离子色谱图(右边系列)阐明了在相同8-10分钟时间段内所获得的流失结果。
通过LC/MS分析,极性嵌入式色谱柱的TIC追踪和MS光谱(之前通过UV检测显示有显著流失)再次显示柱流失水平较高。
来自空白运行(在没有连接色谱柱的情况下开展)的MS光谱可以使背景系统流失量化。
ACE C18-PFP色谱柱和刢先的C18色谱柱均显示与空白运行相似的流失水平,这表明正在发生的柱流失可以忽略。