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如何在奥林巴斯显微镜(CX31)下区分活细菌和死细菌

时间:2015-06-30      阅读:4062

    可以采用染色法。碘化丙啶是红色荧光活力染料,结合DNA。碘化丙啶不能穿透活细胞和早期凋亡细胞的细胞膜,当细胞失去膜的完整性,碘化丙啶可染色DNA,也就是说它可以染死细胞,这个是常用的方法。
    Trypan Blue是一种常被使用于细胞染色的染剂。Trypan Blue无法穿透活细胞的细胞膜,但是当细胞受伤或死亡,细胞膜破损时,Trypan Blue则可以通透细胞膜进入细胞内,使细胞染成蓝黑色。利用此一特点,配合血球计数器的使用,则可以在奥林巴斯显微镜(CX22/CX31/CX41)底下,分辨出细胞样本中的活细胞与死细胞,以方便细胞计数。
    一般用美蓝与碱性品红的复合染料进行死菌的区分。染色后,活菌染为蓝色,死菌和培养基偏红,在显微镜(CX22/CX31/CX41)下很好区分。碱性品红用乙醇加热溶解,过滤,按1:10左右加入,可以根据情况适当调整到可以区分活菌和培养基即可。这是发酵中检查是否染菌的zui常用方法。
    蘸取含细菌的液体LB培养基,在奥林巴斯显微镜下直接观察,活菌游动,而死菌不动,这是zui简单的一种粗略的方法,用户可以试试。

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