冻融工艺在mRNA疫苗中应用
时间：2024-11-21 阅读：217
信使RNA（mRNA）是一类新兴的生物治疗药物。虽然它们有相当大的前景，但这一领域仍处于起步阶段。mRNA治疗为挑战性疾病的靶向治疗和灵活生产提供了新的机遇，抗C O V I D - 1 9的mRNA疫苗的快速发展就证明了这一点。
mRNA的临床潜力已经超出了疫苗的范畴，扩展到其他先进的治疗方法，例如蛋白质替代、基因治疗和癌症免疫治疗。
由于mRNA是脆弱的，不稳定的，开发 mRNA 疫苗的最重要的挑战仍然是其固有的不稳定性，因为它很有可能在冰点以上分解。
mRNA 构建模块的修饰以及能够相对安全地包裹它颗粒的开发帮助了mRNA 疫苗候选者。但是这种新型疫苗仍然需要冷冻条件存储、运输和管理。
WHO世界卫生组织在对mRNA在冻融方面的建议 ：
在用脂质纳米粒 包封期间以及生产条件下应特别注意尽量减少 mRNA 的降解，这个包封和生产添加会影响脂质纳米粒及最终 mRNA-LNP 疫苗产品的稳定性，例如：产生的影响条件包括mRNA解冻和LNPs或mRNA- LNPs的冷冻速率。
已上市的某mRNA产品中在研发到生产中的冻融应用
Assessment report---C O V I D - 1 9 Vaccine（根据某上市的mRNA疫苗的评估报告---EMA）
特征
申请人提供了mRNA活性物质的详细特征，包括mRNA CX-024414结构特性的详细信息。此外，还提供了色谱图、热变性和冻融降解及其对蛋白质表达的影响数据。
评：该公司提供了向监管机构提供了冻融降解的数据，以及冻融对蛋白表达的影响数据
最终产品的成分
添加蔗糖是为了通过冷冻/解冻和长期储存来提高产品的稳定性。
评：该公司-采用蔗糖来提高冻融和存储稳定性
生产工艺开发
载有 mRNA 的 LNP 中间体
该产品由一种mRNA-脂质复合分散体组成，其中包含编码2019年XIN XING冠状病毒（SARS-CoV-2）融合前稳定 Spike 蛋白的mRNA（CX-024414）。已提供全面的开发数据。已经描述了在开发过程中所做的变更。它们包括放大、增加批量冷冻步骤、改变一些设备和修改脂质摩尔比以与平台工艺匹配。
评：---在生产工艺开发过程中增加了大体积冷冻步骤。
产品生产和工艺控制---涵盖了冷冻工艺
LNP 制造过程包括脂质储备溶液 (LSS) 制备、纳米沉淀混合、切向流过滤 (TFF)、稀释和冷冻保护剂添加、澄清、填充以及冷冻和储存。
评：---在生产产品过程中冷冻和存储是分开的。产品经冷冻后存储。工艺步骤必须关注批次间和批次内的均一性，冷冻速率是关键参数。
产品的稳定性
载有 mRNA 的 LNP 中间体
使用开发批次进行了支持负载 mRNA 的 LNP 中间冻融循环的稳定性研究。结果表明，mRNA-1273 LNP 生物物理属性（粒径、多分散性、封装）不受不同冻融过程（室温或 2°C 至 8°C）或 5 个冻融循环的影响，还进行了支持成品冻融循环的稳定性研究。冻融循环最多重复五次。所有结果都在规格范围内，表明最终产品在重复冻融步骤方面相对稳定，支持五个冻融循环。然而，批准的产品信息中不允许在上市时反复冻融小瓶。
评：--经优化的冻融工艺在规格范围内，该公司的公司对产品的稳定性没有影响
临床研究的设计和执行---仍需要评估冻融的稳定性，涵盖运输和存储
RT-PCR 测定得到了可接受的验证，并提供了额外的验证研究，以评估临床样品在各种温度和冷冻/解冻循环中的稳定性，以涵盖运输和储存条件。
评：在临床解冻做的冻融稳定性实验，涵盖运输和存储，为后期上市做准备
该公司的冻融工艺条件是什么?
该公司冻融工艺的开发过程中，和SUS做了紧密合作，SUS根据此公司的要求，开发相应的工艺配方。
1. 特殊要求的冻融曲线降低了对mRNA产品的影响，影响主要来源于以下三个方面：
目标必须是在冻结过程中减少压力
压力主要这几方面
• 冷冻浓缩
• 漂移
• 蛋白质与冰表面的相互作用
2.mRNA冷冻实验得到的工艺数据。
经验丰富的mRNA公司会尽可能快地冻结mRNA（在< 5小时内从+到-60°C冻结）
SUS公司SUS专注于下游到灌装之间的解决方案。一体解决方案的产品涵盖袋子保护壳RoSS，分装设备RoSS.Fill，冻融设备pFTU，RoSS.Ship运输等
SUS的产品特点：YI LIU的技术
RoSS保护壳的ZHUAN LI技术，WAN MEI保护了袋子的安全；
RoSS.Fill快速精确分装，超高灵活性和安全性；
冻融设备大容量，超低温，WAN MEI的冻融曲线；
RoSS.Ship 超长的保温时间和超高安全的运输方式。
现在RoSS.Fill分装系统和冻融系统在全球已经超过200多个用户。
研熠作为SUS在中国的合作伙伴，提供SUS产品的技术咨询、产品销售和技术服务等。