螺旋体染色液(Levaditi银法)说明书
时间:2024-12-06 阅读:73
产品简介:
螺旋体(spirochaeta)是一类细长、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物,具有细菌的基本结构,细胞壁有脂多糖和壁酸,螺旋体分为密螺旋体(如梅毒螺旋体)、疏螺旋体(如回归热螺旋体)、钩端螺旋体等;梅毒螺旋体有 8~12均匀的螺旋,两端尖直;钩端螺旋体细长,数目较多而且细密,一端或两端弯曲呈钩状,菌体亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋体和钩端螺旋体可用镀银法进行显色,如 Levaditi 法、Warthin-Starry 法。
螺旋体染色液(Levaditi 银法)是利用螺旋体具有的嗜银性,在一定条件下螺旋体可从银液中吸附银离子,经还原液处理后,螺旋体内吸附的银离子被还原为黑色的金属 银而显色,主要用于显示梅毒螺旋体,亦可显示钩端螺旋体,但较少显示热回归螺旋体,对肝脏梅毒树胶肿和肝脏钩端螺旋体具有鉴别作用。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
操作步骤(仅供参考):
1、组织切片厚度1~2mm 为佳,置于10%福尔马林中固定2~4天。
2、流水冲洗过夜。
3、95%乙醇浸泡24h,蒸馏水浸洗并不停摇动,直至组织下沉为止。
4、更换新的蒸馏水浸洗 10min。
5、入银溶液加盖置于37℃恒温箱孵育1天,更换新的银溶液,继续 37℃恒温箱孵育2 天。
6、蒸馏水浸洗3次,每次10min。
产品组成:名称 | 规格 3×50ml |
Storage | |
试剂(A):银溶液 | 2×50ml | RT 避 光 | |
试 剂 (B): Levaditi 还原液 | B1: Levaditi 还原液 A | 25ml | RT 避 光 |
B2: Levaditi 还原液 B | 25ml | RT | |
临用前,按 B1:B2=1:1 混合,即为 Levaditi 还原液,即配即用。 | |||
使用说明书 | 1 份 |
7、入配制好的 Levaditi 还原液,加盖室温避光孵育2天。
8、蒸馏水浸洗3次,每次 2min。
9、常规脱水透明,浸蜡包埋。
10、切片厚度6~8μm,贴片,烤干。
11、二甲苯或 脱蜡透明液脱蜡 2 次,中性树胶封固。
染色结果:
梅毒螺旋体、钩端螺旋体 | 黑色或棕黑色 |
背景 | 淡黄至棕黄色 |
注意事项:
1、 实验所用器皿需用硫酸洗液浸泡,洗干净。
2、 步骤4、5的洗片步骤很有必要,一定要把组织中的甲醛和乙醇充分清除,否则易导致组织内银盐的沉淀。
3、 某些细菌和真菌菌丝也会被该染液染成黑色,应注意螺线体为螺旋状形态,并加以鉴别。
4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
有效期:12个月有效。