使用培养基做植物细胞组织培养条件选择介绍

一 光照

光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要的影响,一般来说,光照强度较强,而光照强度较弱幼苗容易图长.离体培养条件下常用盖得光亮,一般为1000-4000勒克斯.离体培养中通常难达到4000勒克斯,一般光亮在2-3000勒克斯.光照强度的高低直接影响器官的分化频率,高光亮可以降低植物体内生长素水平,低光亮使植物体内生长素水平较高,这个情况下容易生根.例如烟草和可可的体胚发生需要高强度的光照:龙岩的体胚发生需要需要黑暗条件,光照会严重抑制其发生,

光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖以及器官的分化都有明显的影响.对苗再生zui有利的光谱是蓝光区,根的发生则是红光区.如在烟草髓部组织分化秒的培养中,起作用的主要是蓝光区,连接黑暗下,培养物停留在芽的分化,不能成苗:红光能促进菊芋块茎组织形成根;烟草花粉培养中,红光和低光强的白光效果;但曼陀罗花药培养中,红光则抑制胚状体形成.离体培养条件下,一般用日光灯进行光照,光谱成分组要是蓝紫光,波长在419-467nm对芽分化有效光谱成分为蓝紫光,根分化则受600-680nm所刺激.

光周期对植物细胞有脱分化和再分化的效应.离体培养中光周期的调节zui常用16小时光照,8小时黑暗,愈伤组织诱导节段,一般采用三种做法:全暗,周期性光照和散射型光照.依照植物种类不同,做法不同,大多数植物适合全暗或周期性光照.在器官发生阶段,一般给予周期性光照比较好

二 温度

大多数植物细胞培养都在23-27度之间进行,一般采用25正负2度环境.低于15度培养时,植物细胞会表现为生长停止,高于35度时对植物生长不利.但是,不同植物培养的室温不同.温度不经影响植物细胞培养育苗的生长速度,也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程.

三 湿度

冬季应减少琼脂的用量,否则将影响培养基感应.以致不利于外植体接触或插进培养基,导致生长受阻.封口材料也直接影响容器内湿度的情况,但封闭性较高的封口材料荣引起透气性受阻,导致植物生长发育受影响.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求70-80%的相对湿度,常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度.湿度过低会使培养基丧失大量水分,导致培养基成分浓度的改变和渗透压的升高,进而影响组织培养的正常进行.湿度过高棉塞容易长霉造成污染.

四 PH值

不同的植物对培养基的PH值要求不同,大多在5-6.5左右,一般培养基为5,8.一般来说PH高于6.5时,培养基会变硬;培养基低于5时,琼脂不能很好的凝固.在高温灭菌时会降低PH大约在0.2-0.3.因此配制时一般要求高处0.2-0.3个单位.

五 渗透压

培养基中有盐类,蔗糖等化合物,因而影响渗透压的变化.通常1-2个大气压对植物生长有促进作用,2个大气压以上对生长有阻碍作用,5-6个大气压会使植物组织停止生长,6个以上大气压细胞不能生存.甘露醇,山梨醇可以作为调节物质.

六 气体

植物组织培养氧气是必须的因素,瓶盖附有滤气膜的封口材料,固体培养基可加入活性炭来增加通气度,以利于发根.培养室应经常换气,改善培养室的通气状况.

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