一般细胞因子的检测，都是采用常规的夹心法ELISA检测，由于因子分子量比力大，一般10几个KD左右，很容易找到两个或多个抗原表位。而小分子很难找到两个不通的表位，也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案便是酶标板上包被二抗，每个孔加入一定量的酶标的小分子，然后加样品，再加不带标志的检测抗体，显色底物。样品的目标小分子的含量越高，吸光度越低。病原体抗原的定性与定量，评估自己制备的血清抗体的效价等。
   
    兔ELISA试剂盒中封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。蛋白和非离子型去污剂。如果未结合的材料残留在微孔板中，那么它会增加背景噪音，可增加洗涤液中的盐浓度，这会阻止非特异结合反应。兔ELISA试剂盒如果试剂稍有不同，则可能需要优化抗体的量。切勿使用过多的检测试剂。如果浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高背景。固相载体表面有能被此蛋白质*覆盖，兔ELISA试剂盒其后加入的血清标本和酶结合物，其中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，zui后产生非特异性显色而导致本底偏高。