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线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒
参数规格:
编号 | 产品名称 | 检测方法 | 规格 |
KY107 | 线粒体呼吸链复合体Ⅴ活性测试盒 | 微量法 | 100管/96样 |
产品资料:
试剂一:100mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂二:80mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂三:2 mL×1 瓶,-20℃保存; 试剂四:粉剂×1 支,-20℃保存;临用前加入2mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存; 试剂五:8mL×1 瓶,4℃保存; 试剂六:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入4mL 蒸馏水,充分混匀; 试剂七:粉剂×1 瓶, 4℃保存;临用前加入10mL 蒸馏水,充分混匀; 试剂八:粉剂×1 瓶, 4℃保存;临用前加入10mL 蒸馏水,充分混匀; 试剂九:液体10mL×1 瓶,室温保存。 定磷试剂的配制:按H2O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染(请根据需要,用多少配多少)。 注意:配试剂用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,或者一次性塑料器皿,以避免磷污染。 | 电子名片 |
工作原理:
复合体Ⅴ水解ATP 产生ADP 和Pi,通过测定Pi 增加速率来测定复合体Ⅴ活性。
测定意义:
线粒体复合体Ⅴ又称F1F0-ATP合酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,由F1和F0两个亚单位组成。该酶利用呼吸链产生的质子电化学梯度催化ATP合成,也可逆过程水解ATP。此外,复合体Ⅴ还存在于叶绿体、异养菌和光合细菌中。复合体Ⅴ是线粒体氧化磷酸化和叶绿体光合磷酸化合成ATP的关键酶。
标本处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、准确称取0.1g 组织或收集500 万细胞,加入1mL 试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
2、将匀浆600g,4℃离心5min。
3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心10min。
4、上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅳ(此步可选做)。
5、步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL 试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10 秒,重复30 次),用于复合体Ⅳ酶活性测定。
产品图片:
订购流程:
1、报价含普票、运费。
2、常用试剂备货充足,除对温度要求极其严格的产品当天可发货。
3、进口原装产品要3-6周的货期,详细情况请咨询客服。
4、订货时间为工作日每周一至周五16:00之前。
5、如需代为检测,标本对环境温度高,可客服安排专人取样(限省内客户)。
6、代测免收代测费,一周出结果。
7、产品因运输途中包装破损请拒绝签收,做退回。我们将在24小时之内为您补发损坏产品
8、如因单位财务制度原因,可申请先发货,报账后付款(此条款仅限医院、学校信誉良好客户)。
其他规格产品:NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
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试剂三:2 mL×1 瓶,-20℃保存;
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合作单位:NAD-苹果酸酶(NAD-ME)测试盒
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