早在20世纪初，植物学家Mikhail Tsvet为了分离植物中天然色素，设计了早的色谱实验：碳酸钙被置于玻璃管中，石油醚被选作流动相，不同的色素按疏水性由强至弱的顺序被洗脱。经过数十年的发展，5um~10um大小的球形硅胶颗粒，也就是现在被广泛应用于HPLC系统的商品化色谱柱才开始大规模生产。与Tsvet实验类似的色谱模式，被称为正相色谱（normal phase chromatography）。相对应的，组分的洗脱顺序相反，疏水性强的化合物更晚被洗脱的情况，则被称为反相色谱（reversed-phase chromatography）。反相色谱已经成为了现今应用广泛的色谱模式。为了在反相色谱体系中达到理想的分离效果，我们对固定相、流动相、温度等等参数一一进行优化。接下来我们将讨论一个简单情况：各组分按疏水性差异被依次洗脱。

        今天的主角：C18。C18现今的“江湖地位”可以说是天时、地利、人和三者相互结合的结果： 

   C18分子本身与样品组分，进行简单的疏水相互作用，不受二级作用（例如，氢键）的干扰。当目标组分被流动相带入硅胶孔隙中，依据疏水性的差异，不同组分在固定相上“停留”的时间也不同。

   C18与硅胶也堪称天作之合。通常情况下，硅胶基质色谱填料，通过硅烷化试剂与硅胶表面的硅羟基进行缩合反应，以达成化学键合。而各类单功能团硅烷之中，十八烷基二甲基氯硅烷的键合反应相对更容易控制。C18在自然状态下非常稳定，小于18个碳原子的直链烷烃在物理性质上倾向于液体，不易控制。

      C18提供的疏水选择性“刚刚好”。既不会由于C链过长导致容易吸附样品（主要还是针对小分子来说，大分子仍旧容易在C18吸附），也不会因为疏水性不足而导致无法分离各组分。

     由此可见，在使用C18色谱柱时，组分在流动相中的状态应当成为我们时刻关注的一个重要点。