仪器的维护与保养（二）

续前期内容，下面分别介绍进样部分、分离部分、检测部分的使用方法和注意事项。

3、进样系统

进样系统分为手动进样阀和自动进样器。

1、手动进样阀。对于手动进样阀使用过程中需要注意每个样品进样完成后应对进样阀进行清洗，防止残留对下一个样品分析的影响。还需要注意进样方式，以20μL定量环为例，我们可以选择*充满定量管或部分充满定量管。为了保证进样的重复性，选择*充满定量管进样方式时，需要注入定量环体积3倍以上的样品；选择部分充满定量管进样方式时，进样体积应在定量管体积一半以下，即1-10μL。

2、自动进样器。如果采用自动进样器进样，首先需要保证注射器里面没有气泡存在，否则影响进样量准确性；其次是样品瓶里面有足够的样品，保证进样针能够吸到样品。为了避免交叉污染需要定期对样品瓶、盖和垫进行清洗。若自动进样器长时间不使用，应该注意：腐蚀性的流动相或洗液（例如，碱性或酸性缓冲溶液）必须*从系统中置换出来。同时，为了避免细菌的生长，应将一个样品瓶中充满甲醇，并重复几次进样操作。

4、分离系统

分离系统包括色谱柱、保护柱以及柱温箱。

1、色谱柱。色谱柱是样品分离的核心。色谱柱在使用前必须仔细阅读说明书，了解色谱柱使用的pH值范围、溶剂耐受范围、压力范围和维护方法等事项。色谱柱使用完后，需及时对色谱柱进行冲洗。冲洗完成后，应该将色谱柱从仪器上拆下来，两端用厂家配的堵头密封后，保存在色谱柱盒里。

2、保护柱。保护柱的作用主要是防止吸附性强的杂质对色谱柱污染，从而延长色谱柱的寿命。针对不同型号的色谱柱，应选择相对应填料的保护柱。应注意柱芯也是有寿命的，应该定期进行更换。

3、柱温箱。色谱柱温度变化，可能会导致保留时间的变化。为了避免这个问题，建议使用柱温箱。

5、检测系统

HPLC常用的检测器是紫外检测器。在日常使用过程中紫外检测器主要需要注意检测池和氘灯的使用与维护。

1、检测池。检测池长时间使用可能会造成污染，如果仪器的参比能量（REF ENERGY）正常，测量能量（SMP ENERGY）偏低，可能为检测池污染导致，可以对检测池进行清洗。对检测池零件的进行清洗，一般先采用约1：4的硝酸溶液超声清洗，分别用纯水和甲醇溶液清洗，然后重新组装并将检测池池体推进池腔内，拧紧池板螺丝。注意组装中，池玻璃及垫片一定要放正，以免压碎池玻璃，造成检测池泄漏。

检测器检测池组装示意图

1.检测池前板；2.检测池体；3.池体螺丝；4.池板螺丝；5.压紧螺母；

6.压紧螺母垫片；7.池玻璃；8.池玻璃垫片。

2、氘灯。氘灯正常使用寿命可在1500小时以上。灯的使用寿命与检测器的使用时间和开启频率有关，因此使用过程中应尽量节省不必要的开机时间，减少开关频率，以延长氘灯的使用寿命。如果准确地判断出氘灯已经不能点亮或能量太低，则需要更换新的氘灯。在购买氘灯时，应注意咨询和核对氘灯的型号与仪器型号是否匹配。更换到氘灯时，参照仪器说明书中的相关内容，特别要注意氘灯连接线的位置顺序。