饲料粗脂肪的测定方法【教学目标】

1.学会各种饲料样本的粗脂肪的方法。

2.学会仪器的使用

【教学重点】样本的测定方法。

【教学方法】操作指导

【课时分配】6学时

【原理】索氏脂肪提取器中用提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸，磷脂、脂溶性Vit，叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或提取物。

【分析步骤】

1）仲裁法使用索氏脂肪提取器测定。

索氏提取器应干燥无水。抽提瓶(内有沸石数粒)在105℃±2℃烘箱中烘干60min，干燥器中冷却30min，称重。再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于0.0008g为恒重。

称取试样1～5g(准确至0.0002g)，于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105℃±2℃烘箱中，烘干120min(或称测水分后的干试样，折算成风干样重)，滤纸筒应高于提取器虹吸管的高度，滤纸包长度应以可全部浸泡于中为准。将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水60～100mL，在60～75℃的水浴(用蒸馏水)上加热，使回流，控制回流次数为每小时约10次，共回流约50次(含油高的试样约70次)或检查抽提管流出的挥发后不留下油迹为抽提终点。

取出试样，仍用原提取器回收直至抽提瓶全部收完，取下抽提瓶，在水浴上蒸去残余。擦净瓶外壁。将抽提瓶放入105℃±2℃烘箱中烘干120min，干燥器中冷却30min称重，再烘干30min，同样冷却称重，两次重量之差小于O.OOlg为恒重。

2）结果计算

式中：m ——风干试样重量，g。

m₁ ——已恒重的抽提瓶重量，g。

m₂——己恒重的盛有脂肪的抽提瓶重量，g。

3）推荐法

⑴鲁氏残留法

①操作步骤

a.将脱脂滤纸裁成10×10cm²大小，叠成一边不封口的纸包，用铅笔编号，按顺序排列于培养皿上，置于105℃土2℃烘箱中烘2h，取出放于干燥器中冷却至室温，分别放入同一称量瓶中称重(m₀，g)。

b.将2～5g风干样品(通过40目筛)用小药匙小心装入已经称重的纸包中，封上包口。

饲料粗脂肪的测定方法按顺序排列于培养皿中。置于105℃±2℃烘箱中烘3h，取出放入干燥器中冷却至室温，分别放入原称量瓶中，称至恒重(m₁，g)。将样品包放入抽提管中，倒入无水，使之刚超过样品包高度，浸泡过夜。然后将浸泡过样品的无水放入抽提瓶中，再重新向抽提管中倒入无水，使之*浸没样品包。连接装置，接通冷凝水，在70～80℃水浴锅中回流6～8h，回流速度以每分钟20mL左右为宜。抽提完毕，取出样品包，在通风处挥干．剩余可进行回收。

c.将样品包仍按原序号排列在培养皿中，置于105℃±2℃烘箱中烘2h，取出放入干燥器中冷却至室温，再将样品包放原称量瓶中，称至恒重(m₂，g)。

主要特征:

1、加热抽提，溶剂回收和冷却三大部分组成；

2、脂肪测定仪操作时可以根据试剂沸点和环境温度不同而调节加热温度；

3、试样在抽提过程反复浸泡及抽提，从而达到快速提取目的；

4、可自动回收溶剂，大大方便了用户的使用，并节约了很多时间；

5、抽提时间可调，到时报警。

饲料粗脂肪的测定方法技术参数:

饲料粗脂肪的测定方法②结果计算

粗脂肪＝  m₁－m₂×100%

          m₁－m₀

式中，m₀——滤纸＋称量瓶重（g）；

m₁——提取前样品包＋称量瓶重（g）；

m₂——提取后样品包＋称量瓶重（g）。

上述两种方法都是以为溶剂的提取方法，其优点是具有的准确度和精密度，尤其是测定粗脂肪含量在5%以下的样品，用此法比较可靠。缺点是费工费时，反复提取需8～16h；另外不能将样品中的全部脂肪提尽。这是因为部分脂肪常与蛋白质或碳水化合物等非脂肪成分结合。成为结合态脂类，如脂蛋白、糖脂、磷酯等，同时样品也必须是烘干的，因难以渗入含水样品的组织内部。在烘干样品时，又应考虑到脂肪在高温下易被空气氧化等情况。

⑵脂肪测定仪

①操作步骤

a.打开恒温加热装置开关，控制工作温度为75℃。

b.用万分之一分析天平称2g左右的样品(准确至0.0002g) (m₁)，放入滤纸筒内烘干。

c.用套筒夹将6个滤纸套筒装入浸提冷凝管内，当确信套筒已被磁铁吸牢后取下套简夹。

d.用分析天平称浸提杯重量(m₂)，然后加入约50mL无水，用杯托将6个浸提杯放在加热板上，再将冷凝管提升机构搬下，使浸提怀与冷凝管连接好。

e.事先接通浸提冷凝管的冷却水，将滤纸筒置于“沸腾”位置。冷凝管应有良好的冷凝作用；

f.无水沸腾15min或30min(依样品含油量而异)后，将滤纸筒提升到“冲洗”位置，冲洗30min或45min。

g.冲洗结束后，关闭冷凝管旋塞阀，回收。

h.松开冷凝管提升机构，取下浸提杯，并放入烘箱烘干。

i.在干燥器中冷却浸提杯，然后用分析天平称重(m₃)。

j.按以下公式计算样品中粗脂肪含量。

②测定结果的计算

粗脂肪＝W₃－W₂×100%

                  W₁

式中 ：W₁——风干试样重量，g。

W₂ ——已恒重的浸提杯重量，g。

W₃——己恒重的盛有脂肪的浸提杯重量，g。

6.3.3.7  重复性每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允许相对偏差为3%。粗脂肪含量在10%以下时，允许相对偏差为5%。

【实训作业及思考题】

1.测定混合饲料、配合饲料、浓缩饲料或单一饲料中粗脂肪的含量，并写出实训报告。

2.脂肪包的高度超过虹吸高度对测定结果有何影响？为什么？

3.脂肪测定仪对饲料脂肪的测定有何优点?

4.对测定zui后放入105℃±2℃烘箱中需干燥的包、瓶或杯有何要求？

5.测定zui后包、瓶或杯在105℃±2℃烘箱内的干燥时间为什么不能过长?过长是否会影响测定结果?

饲料粗脂肪的测定方法（索氏提取器脂肪测定仪）参考资料：杭州聚同电子有限公司