QM100研磨仪在酵母细胞低温破碎中的使用
时间:2017-05-11 阅读:1343
条形酵母是将酵母通过小孔注入到装有液体氮的气罐中压缩制成的。将有1mm的筛子扣入到装有10-
20 ml球状酵母的50ml破碎罐的顶部,经过离心破碎变成了2L的条状物。压力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐内,条状可以在-80C°下被保存。
将不锈钢破碎罐、破碎球和装有条状酵母的器皿放入到用聚苯乙烯盒子盛放液体氮中,当预冷冻过程结束后,原来沸腾的液体氮恢复平静
将破碎罐从池中取出,并要将破碎罐沾有的液体全部清理干净,以避免在破碎过程中发生爆炸。破碎罐、破碎球和器皿好用有把手的煤气钳或坩锅钳拿取,而且通常要带经过冷冻的手套。
将破碎球和条状酵母移入破碎罐中。罐中装有一半的条状酵母,易碎的条状酵母被破碎球预冷冻的抹刀破碎,酵母的数量不要超过破碎罐体积的1/3,否则破碎的效率就会变得很底下。
然后将破碎罐盖紧,在安装在破碎机之前将破碎罐再次放入到液体氮中几秒钟,然后将破碎罐夹紧。
破碎次数为5次,每次3分钟,功率为30hz。在每次破碎后都要将破碎罐取下,放入到装有液体氮的水池中。当水池沸腾后,破碎可以继续进行。所需样本后可以得到,而且也通过显微镜可以看到有价值的破碎过程。
经过15分钟的破碎后,我们发现90%的酵母已经达到破碎效果。
剩余的残渣被回收到50ml的器皿中以备后用或贮存。然后用一种具有永磁性的磁铁把破碎球从残渣中吸出回收。
破碎罐和破碎球可以用温的乙醇清洗,放到干燥处贮存。