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了解一下液相色谱仪的五大系统组成

时间:2023-03-16      阅读:3682

  液相色谱仪是由各个系统组成的,它各个系统相结合可以提供更高的可靠性、稳定性和易操作性,每一个系统它的作用尽不相同,那么液相色谱仪由什么系统组成,各个系统又有什么作用?下面就来告诉大家。
 
  液相色谱仪的五大系统组成如下:
 
  1.进样系统
 
  一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。
 
  这对提高分析样品的重复性是有益的。
 
  2.输液系统
 
  该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l.47~4.4X107Pa流速可调且稳定,当高压流动相通过层析柱时,可降低样品在柱中的扩散效应,可加快其在柱中的移动速度,这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存错和梯度仪,可使流动相随固定相和样品的性质而改变包括改变洗脱液的极性、离子强度、pH值或改用
 
  3.分离系统
 
  该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。
 
  色谱柱一般长度为10~50cm(需要两根连用时,可在二者之间加一连接管)内径为2~5mm,由优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成,柱内装有直径为5~10μm粒度的固定相(由基质和固定液构成),固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成,它们都有惰性(如,硅胶表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性和比表面积大的特点,加之其表面经过机械涂渍(与气相色谱中固定相的制备一样)或者用化学法偶联各种基因(如,磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等)或配体的有机化合物。
 
  因此,这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性,例如,在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素(PSA)后,就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。另外,固定相基质粒小,柱床极易达到均匀、致密状态,极易降低涡流扩散效应。基质粒度小、微孔浅,样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。
 
  4.检测系统
 
  液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种:
 
  紫外检测器
 
  该检测器适用于对紫外光(或可见光)有吸收性能样品的检测。
 
  其特点:使用面广(如,蛋白质、核酸、氨基酸、核苷酸、多肽、激素等均可使用);灵敏度高(检测下限为10-10g/mL);线性范围宽;对温度和流速变化不敏感;可检测梯度溶液洗脱的样品。
 
  5.数据处理系统
 
  该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。
 
  综上所述,液相色谱仪由样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成,这几个系统相结合,使实验更可靠、稳定。
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