伞枝梨头霉PCR试剂盒的样品DNA的制备过程是怎样的
时间:2021-11-26 阅读:888
伞枝梨头霉PCR试剂盒的样品DNA的制备:
1、用自选方法纯化样品的DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
2、如果有N个样品,则需要进行N+2个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
3、配制溶液A工作液。如果待测样品数量为其他数字,配制的溶液A工作液的体积需要做相应的调整。
4、在标记好的N+2个离心管中,加入1-5mg固体样品(半粒芝麻大小)或5uL液体样品待测样品。在样品制备阳性对照中加入5uL阳性对照,在样品制备阴性对照中加入5uL水。
5、在每个管中加入100uL溶液A工作液,确保固体样品被溶液淹埋,如果是液体样品则震荡混匀。
6、95℃保温10分钟。
7、待冷却到常温后加入10uL溶液B并混匀得DNA释放液。每个样品得到的DNA释放液足够进行50-100次PCR。
本试剂盒用于病料组织中病毒的检测,具有与柱提取方法相当的敏感性,且用本试剂盒可免除组织研磨和核酸提取步骤,加快检测流程,加大检测能力,减少实验室污染。前期研究结果显示,对于动物各内脏、耳、尾等组织,均不需要研磨而直接裂解。也可以对含有骨髓的骨组织,直接用试剂盒处理和扩增。