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悬浮细胞的处理方法;奥陆生物

时间:2017-02-21      阅读:3577

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悬浮细胞处理方法

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满*培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。

细胞悬液移入离心管,1000rpm/min 离心5分钟。上清培养液移入无菌瓶中,留待日后培养用。离心下来的细胞T25瓶中加培养液6-8ml,混匀后放入37℃5%CO2孵箱培养。

传代方法

细胞生长至1X106/ml时(一般情况)将细胞悬液移入离心管800-1000rpm/min离心5分钟,然后弃上清,加新鲜培养液混匀,1瓶分成3瓶或6瓶-10瓶T25瓶加培养基至6-8ml,37℃5%CO2孵箱培养

 

细胞使用培养基:1DMEM(高糖)    2R1640    3R1640(改良    4、MEM(EBSS)    5MEM(NEAA)    6D/F12    7F12    8F12K    9、MaCcoy‘    10、L15    

血清要求:1、20%FBS    2、15%FBS    3、10%FBS    4、5%FBS    5、2.5%FBS    6、15%HS    7、10%HS    8、5%HS    9、2.5%HS    10、10%CCF(灭活)

冻存液常规培养液+20%FBS+8%DMSO

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