荧光显微镜及荧光数码成像拍照的选择及注意事项
时间:2021-08-10 阅读:3386
荧光显微镜以及荧光拍照相机(显微镜相机)
荧光显微镜是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光显微镜广泛应用于生物,医学等领域等
⑴荧光显微镜—般分为透射和落射式两种类型。
a.透射式激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使发光不进入物镜,而使荧光进入物镜。它在低倍情况下明亮,而高怕仅暗,在注漫和淘中时,较谁操作,尤以低倍的照明被围准于确定,但能得到很暗的视野背景。透射式不使用于非透明的被检物体。
b.落射式目前几乎被淘汰,新型的荧光显微统多为落射式,光源来自被检动依的上方,在光路中具有分光镜,所以对透明和不适明的被检物休体都适用。由于物确起了聚光接的作用,不仅便于操作,而且从低倍到高倍,可以实现整个视场的均匀照明。
(2)荧光镜检术的注意事项
a.激发光长时间的照射,会发生光的衰减和淬灭现象,因此尽可能缩短观察时间,暂时不观察时,应用挡板遮盖发光。
b.作油镜观察时,应用无荧光镜油”。
c.做荧光实验,普遍荧光比较弱,应在较暗的室内进行。电源可装稳压器,否则电压不稳不仅会降低汞灯的寿命,也会影响效果,目前新研究领域都会用到荧光显微镜,如基因原位杂交FISH)等。
荧光拍摄通常需要使用制冷型CCD(成像系统相机),因为制冷CCD可以减少背景噪声,对弱荧光信号采集很有好处,特别是像单分子成像。采集强光信号不一定要用制冷CCD,可使用黑白相机,彩色相机不适合荧光采集,因为其感光度低、分辨率也低,除非荧光信号很高,对分辩率要求不高或者使用双通道滤色片时才适合用彩色相机。
荧光显微镜可以用启步BM1000Z 2000Z BM4000D BM3000D,进口可使用奥林巴斯BX53、BX43、CKX53。尼康NI、CI系列等都可以,相机也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都是不错的选择。