一种简单实用的细胞冻存方法
时间:2016-12-20 阅读:1841
一种简单实用的细胞冻存方法
我们实验室一直用一种特简单但非常安全的细胞冻存方法,与大家共享:
冻存液:一般用10%DMSO(推荐用sigema原装的,质量好不用预消毒)+10%血清的*培养基,如果细胞珍贵的话用10%DMSO+90%全血清
降温方法:用zui少两厘米厚的医用棉纱将冻存管紧紧包裹,扎紧,直接放入-70度冰箱,隔夜取出冻存管直接放液氮冻存。
复苏效果对比:细胞冻存2周后复苏,本方法冻存的细胞与使用程序性降温仪冻存的细胞复苏效果相差不大,但明显比传统4度、-20度、-70度的方法要好,传统的冻存方法不但费时费力,而且各时间段的放置时间并无严格统一,尤其在4度和-20度时间不好掌握。
要点:面纱包裹一定要足够厚,细胞用冻存液重悬后不要在常温放置太长时间。从-70度取细胞的时间无严格控制,我们曾经放过一个星期后在入液氮,同样可以顺利复苏。
不知是否有人发过,给没有尝试过的战友试一下,我们从国外购买的5000元一支的细胞一直用着方法冻存。