免疫组化实验中出现的问题，*免疫组化实验成功的关键是抗体，如果抗体不好，整个实验就基本上不会成功。如何选择抗体成为免疫组化zui头疼的问题，因为一旦实验不成功将浪费我们辛苦收集来的样本，今天让上海恒远与您分享一下如何选择抗体这个问题！

1、一抗质量是酶免疫组化、免疫荧光和Western blotting等试验中的zui关键因素之一。从免疫组化选择抗体来说，质量的公司可能是Chemicon、upstate、Abcam、Dako公司等；从Western blotting选择抗体来说，信价比的可能是Abcam公司，一般都1ml，价格在2000元每株左右。而一抗订购中选择原则有1）选择单克隆还是多克隆抗体，前者特异性好，而后者灵敏度高；2）选择何种种属来源？一般兔来源的多是多克隆；而小鼠来源的多是单克隆，但也有另外。这也决定了你的二抗类型。3）检测何种种属的抗原，即species reactivity:Hu-human, Ms-mouse, Rat, Goat, Rb-rabbit, Shp-sheep等；这个很重要。4）抗体类型：IgG1/IgG2a/IgM?一旦一抗选为IgM，那么你二抗就必须是抗IgM；5)应用范围：WB, IP, IF, IHC(P), ELISA?一抗说明书中注明抗体可以应用于western blotting、免疫沉淀、免疫荧光、免疫组化（石蜡切片）、ELISA等等，这根据你实验目的抉择。6）抗体公司的选择，主要根据信价比的高低以及高质量文献数据支持。

2、二抗选择：一般有生物素标记、HRP标记和荧光素标记的二抗等多种。一抗种属选择好后，那么二抗只能是某种抗一抗种属来源的抗体，如果是酶免疫组化，则可以选择Bio-或HRP-标记，可以买不同公司单独的抗体，也可购买二抗染色试剂盒，包括二抗、SP等；而免疫荧光则可以选择荧光素标记的二抗，可以买美国Abcam公司等荧光素二抗，质量还不错。zui后，建议大家可能还是在排除方法、切片中抗原有无等前提下来客观、正确评价各种抗体的质量。

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