elisa试剂盒供应厂商实验过程中，难免会遇到各种不同的问题，比如标准曲线不好，试剂盒的回收率，假阴性，假阳性，实验的重复性不好等等。使用96孔板的elisa试剂盒测定中，常发现有“边缘效应"，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规elisa试剂盒测定中，将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度(如37℃)，就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定的重复性。 

    elisa试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃，温度控制不好，控制正确温度，孵育时间不准确，控制孵育时间，洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干。elisa试剂盒阳光直射，对着风直接吹，避风。酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm，抗体的稀释错误，正确的稀释抗体，水质问题，用娃哈哈矿泉水代替。

    elisa试剂盒添加量不准确，添加浓度不适合，ELISA试剂盒添加合适的浓度。elisa试剂盒取液吹干量多，准确的取液吹干，取到其它相层液体，取需用相吹干，溶液未稀释或加入量少，正确的稀释复溶液。elisa试剂盒添加量不准确，的添加量，添加浓度不适合，添加合适的浓度，取液吹干量少，准确的取液吹干溶液稀释错误或加入量多，正确的稀释复溶液。在现在的elisa试剂盒供应厂商中，必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。elisa试剂盒供应厂商溅出会对邻近孔产生污染。elisa试剂盒供应厂商出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。