细胞β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量检测试剂盒

产品说明书（中文版）

主要用途

   细胞β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物PNP-NAG受到β氨基己糖苷酶催化水解后，在碱性环境下，呈现黄色，即采用比色法来测定样品中酶活性的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体细胞裂解悬液样品中β氨基己糖苷酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase；EC3.2.1.52）.又称为N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl--β-D-Glucosaminidase；NAGase）属于含有20个糖苷水解酶（glycoside hydrolase）家族，也是肽聚糖水解酶，为溶酶体细胞器中的酶之一。其功能在于水解N-乙酰-β-D-氨基己糖苷中的末端N-乙酰-β-D-氨基己糖残基（N-acetyl-D-hexosamine   residues），参与细胞内糖蛋白和糖脂的分解代谢，包括蛋白和中性糖脂中的寡糖、粘多糖等水解。具有宿主抗感染防御作用。β氨基己糖苷酶为同源二聚体结构，有α和β两个亚体构成：HEXA和HEXB。人体缺乏HEXA或HEXB，将导致神经退行性相关的疾病，例如家族黑蒙性*病（Tay-Sachs病）和神经节苷脂贮积病  （Sandhoff 病）。 基于底物4-硝基苯基 N-乙酰-β-D-葡萄糖胺（4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide；PNP-NAG），在β氨基己糖苷酶的作用下，水解释放出硝基苯酚（p-nitrophenol）和N-乙酰-β-D-葡萄糖胺（N-acetyl-β-D-glucosamine；NAG），在碱性环境下，呈现出黄色，在分光光度仪下，产生吸光峰值变化（405nm 波长），来定量分析β氨基己糖苷酶的活性。其反应系统为：

产品内容

   缓冲液（Reagent A）         毫升

   反应液（Reagent B）         毫升

   碱性液（Reagent C）         毫升

   阴性液（Reagent D）             微升

   清理液（Reagent E）         毫升

   裂解液（Reagent F）         毫升

产品说明书           1份

保存方式

保存   反应液（Reagent B）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月

用户自备

1.5毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器

细胞刮脱棒：用于细胞脱离

（微型）台式离心机：用于样品操作

比色皿或96孔板：用于比色分析的容器

分光光度仪或酶标仪：用于比色分析