铭博生物实验室--离子浓度测定报告中文版
时间：2017-07-24 阅读：1558
铭博生物实验室--离子浓度测定报告中文版
离子浓度测定
方法原理
在pH为4.0—5.5的醋酸盐缓冲介质中。锌离子与双硫腙形成红色螯合物，其反应为：
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该螯合物可被四氯化碳（或（）定量萃取。以混色法完成测定。用四氯化碳萃取，锌一双硫腙螯合物的zui大吸收波长为535 nm，其摩尔吸光系数约为9.3×104。在本法规定的实验条件下，样本中正常存在的金属离子不干扰测定。锌的zui低检出浓度为0.005mg/L。
仪 器
（l）分光光度计，应用10 mm或更长光程的比色皿。
（2）分液漏斗：容量为 125和 150ml，配有聚四氟乙烯活塞。
（3）玻璃器皿：所有玻璃器皿均先后用1＋l硝酸浸泡和无锌水清洗。
试 剂
（1）无锌水：将普通蒸馏水通过阴阳离子交换柱以除去水中痕量锌， 用于配制试剂。
（2）四氯化碳（CCl4）。
（3）高氯酸（ρ＝1.75g／ml）。
（4）盐酸（ρ＝1.18g／ml）。
（5）6mol/L盐酸：取500ml浓盐酸用水稀释至1000ml。
（6）2mol/L盐酸：取100ml浓盐酸用水稀释至600ml。
（7）0.02mol/L盐酸：取2mol／L盐酸10ml用水稀释到1000ml。
（8）乙酸（含量36%）。
（9）氨水（ρ＝0.90g／ml）。
（10）1＋100氨溶液：取氨水10ml用水稀释至1000ml。
(11) 硝酸(ρ＝1.4g／ml）。
(12) 2％（V／V）硝酸溶液：取硝酸20ml 用水稀释至1000 ml。
（13）0.2% （V／V）硝酸溶液：取2ml 硝酸用水稀释至1000ml。
（14）乙酸钠缓冲溶液：将68g三水合乙酸钠（CH3COONa·3H2O）溶于水中。并稀释至250ml，另取乙酸1份与7份水混合，将上述两种溶液按等体积混合，混合液再用0.1%（m／V）双硫腙四氯化碳溶液重复萃取数次，直到zui后的萃取液呈绿色不变，然后再用四氯化碳萃取，以除去残留的双硫腙。
（15）硫代硫酸钠溶液：将25g五水合硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）溶于100ml水中，每次用0.05%（m／V）双硫腙四氯化碳溶液10ml萃取，直到双硫腙溶液呈绿色不变为止。然后再用四氯化碳萃取以除去多余的双硫腙。
（16）0.05%（m／V）双硫腙四氯化碳贮储溶液： 称取0.10g双硫腙（C6H5NNCSNHNH·C6H5）溶解于200ml四氯化碳，贮于棕色瓶中，放置在冰箱内，如双硫腙试剂不纯，可按下述步骤提纯：将上述双硫腙四氯化碳溶液滤去不溶物，滤液置分液漏斗中，每次用1+100氨水20ml提取，共提取 5次，此时双硫腙进入水层，合并水层。然后用6 mol／L盐酸中和，再用200ml四氯化碳分三次提取,合并四氯化碳层。将此双硫腙四氯化碳溶液放入棕色瓶中，保存于冰箱内备用。
（17）0.01%（m／V）双硫腙四氯化碳中间溶液：临用前将0.05％（m／V）双硫腙四氯化碳溶液用四氯化碳稀释5倍。
（18）0.0004%（m／V)双硫腙四氯化碳溶液：量取0.01%（m/V）双硫腙四氯化碳溶液10m1，用四氯化碳稀释至250ml（此溶液的透光度在500nm波长处用10mm比色皿测量时应为70% ）。当天配制。
(19) 柠檬酸钠溶液：将10g二水合柠檬酸钠（C6H5O7Na2·2H2O）溶解在90ml水中，按上面介绍方法用双硫腙四氯化碳溶液萃取纯化，此试液用于玻璃器皿的zui后洗涤。
（20）锌标准贮备溶液： 准确称取0.1000g锌粒（纯度 99. 9%）溶于2mol/L 盐酸溶液5ml，移入1000ml容量瓶，用水稀释至标线。此溶液每毫升含100µg锌。
（21）锌标准溶液：取锌标准贮备溶液（100µg／ml）10.00ml置于1000ml容量瓶中,用水稀释至标线。此溶液每毫升含1.00µg锌。
步 骤
（1）显色萃取：取1.0ml（含锌量在0.5—5µg之间）试样置于10ml分液漏斗中，加入乙酸钠缓冲溶液0.5ml及硫代硫酸钠溶液0.1ml，混匀后，再加0.0004%（m／V）双硫腙四氯化碳溶液1.0ml。振摇4min，静置分层后，将四氯化碳层通过少许洁净脱脂棉过滤入20mm比色皿中。
（2）光度测量：立即在535nm波长处测量溶液的吸光度，参比皿中放入四氯化碳。由测量所得吸光度扣去空白试验吸光度之后，从标准曲线上查出锌量，然后按公式计算样品中锌的含量。
空白试验：用适量无锌水代替试样，其它试剂用量均相同，按上述步骤进行处理。
（3）校准曲线的绘制：向一系列10ml分液漏斗中，分别加入锌标准溶液（1.00µg /ml）。0、0.050、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5各加适量无锌水补充到1ml，向各分液漏中加入乙酸钠缓冲溶液0.5m1和硫代硫酸钠溶液0.lml。混匀后，以下按样品测定步骤进行显色萃取和测量。
计 算
锌(Zn，mg/L) =
式中， m——从校准曲线上查得锌量（µg）；
V——用于测定的水样体积（ml）。
注意事项
（1）本法的成败关键在于所用的器皿和试剂以及去离子水，均应不含痕量锌。因此,在进行实验测定之前应先用硝酸浸泡所用器皿，用水冲洗净表面所吸附的锌，然后用无锌水冲洗几次。
（2）所用试液需用无锌水配制。
（3）实验中如出现高而无规律的空白值，这种现象往往是来源于含氧化锌的玻璃，或表面被锌所污染的玻璃器皿。因此，须用酸*浸泡清洗，并保留一套测定锌用的玻璃器皿，单独存放。
橡胶制品、活塞润滑剂、试剂级化学药品或蒸馏水，亦常常含有相当量的锌，因此要特别注意。