单克隆抗体和多克隆抗体之间的区别
时间:2023-09-13 阅读:423
抗体是免疫蛋白质,在宿主对病毒、细菌和真菌等感染性病原体的防御中发挥着基本作用。这些Y型蛋白质的免疫功能是由其结合抗原的能力决定的,抗原是由细胞释放的或在细胞上发现的刺激免疫反应的分子。
除了在宿主免疫中的作用,抗体在研究和治疗方面也被证明是有价值的。两种类型的抗体,多克隆抗体和单克隆抗体为研究人员提供了检测或量化目标抗原的不同方法,主要是由于特异性和亲和力的不同。在这篇文章中,我们将更详细地描述多克隆抗体和单克隆抗体,并考虑每种类型如何用于各种应用。
什么是多克隆抗体?
而多克隆抗体通常是从动物血清中获得抗体,由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合,所以为多克隆抗体,简单来说,多克隆抗体属于多种单克隆抗体的混合物,但多克隆抗体特异性较低。
如何产生用于研究的多克隆抗体?
为了产生适合研究目的的多克隆抗体,首先必须给实验室动物注射刺激免疫反应的肽、蛋白质、分子或整个细胞。
一旦宿主的免疫系统产生了针对注射抗原的抗体,就必须从动物的抗血清中收集和纯化这些抗体。从动物血清中纯化多克隆抗体的一种方法是通过免疫后应用抗原包被磁珠、沉淀或色谱法
在这种基于亲和力的纯化方法减少了最终多克隆群体中的非特异性抗体后,这些抗体就可以用于基于检测的方法,如西方印迹法、免疫组化法和酶联免疫吸附法。
什么是单克隆抗体?
单克隆抗体是指通过B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得,属于单一的B细胞克隆产生的抗原表位抗体,由于单克隆抗体特异性较高,常被用于治疗B细胞淋巴瘤、免疫性溶血性贫血或抗肿瘤。
如何产生用于研究的单克隆抗体?
杂交瘤的产生包括将免疫小鼠的分离脾脏细胞与永生化骨髓瘤细胞融合。然后根据目标抗原的特异性和反应性对产生的杂交瘤的克隆进行筛选和选择。由于单克隆抗体对单一表位具有高度的特异性,它们可以证明对研究科学家和临床医生都是有用的。
单克隆抗体和多克隆抗体之间的区别
属性 | 单克隆抗体 | 多克隆抗体 |
抗体群体 | 同质性 | 异质性 |
结合特异性 | 识别目标抗原上的单一表位 | 识别目标抗原上的多个表位 |
灵敏度 | 蛋白质定量方面灵敏度高 | 对低数量的蛋白质有较高的灵敏度 |
交叉反应 | 特异性高,交叉反应低 | 存在生物物理多样性,交叉反应高 |
生产成本 | 昂贵 | 低廉 |
来源 | 受刺激的B细胞的单系:交杂瘤 | 受刺激的B细胞的多个系别 |
单克隆抗体和多克隆抗体的优缺点
单克隆抗体的优点
1.不朽的供应:一旦创建了单克隆抗体杂交瘤,就可以产生大量的高度特异性抗体。
2.高度特异:mAb在测定中用作一级抗体或用于检测组织中的抗原是非常理想的选择。
3.重现性高:单克隆抗体产生较低背景染色和批次变化,并且具有低交叉反应性。因此,它们提供可重复的结果并确保亲和纯化的效率。
单克隆抗体的缺点
1.特异性过高,以致于无法进行跨物种的检测。
2.与多克隆抗体相比,更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。
多克隆抗体的优点
1.高亲和力:由于抗体的结合点多于一个表位,多克隆抗体可以帮助扩增具有低表达水平的靶蛋白的信号。这使得这些抗体成为免疫沉淀和染色质免疫沉淀的理想选择。
2.容忍轻微的变化:多克隆相对单克隆抗体来说,对于抗原变化(轻度变性,多态性,糖基化的异质性)较不敏感。
3.更强的检测信号:多个表位通常提供更强大的信号,更加容易检测。
多克隆抗体的缺点
1.易产生批次间差异。
2.产生大量非特异性抗体,可能会在某些应用中产生背景信号。
3.由于具有多个表位,检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。
4.不适用于探测抗原的特定结构域,因为抗血清通常会识别多个结构域。