产品及特点 | 本产品是在天泽基因一管式病毒RNAOUT的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品中提取微量病毒RNA的产品,它具有下列特点: - 操作简单,整个过程只需要20分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
- 灵敏度高,通过RT-PCR检测到的zui终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
- 安全无毒,不需要使用苯酚和氯等有机溶液。
- 如果加上病毒离心富集步骤,zui多可以处理1.5 mL液体病毒样品。
- 与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
- 价廉物美,性价比远低于国外同类产品。
- 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
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规格及成分 | 成份 | 编号 | 大纸盒包装 | 柱式病毒RNAout溶液A | 71001A | 30 mL | 离心吸附柱(小提) | 60911 | 50套 | 通用洗柱液 | 60408 | 50 mL | RNA洗脱液 | 71207 | 10 mL | 使用手册 | 1份 |
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运输及保存 | 常温运输,4℃保存,有效期一年。 |
自备试剂 | 无 |
使用方法 | - 在1.5 mL离心管中加入0.1-0.2 mL液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5 mL液体在4℃下24,000 g冷冻离心60分钟,移弃1.3 mL后继续操作。
- 加入0.6 mL溶液A,振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀*溶解并充分摇匀后再取用。
- 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
- 12,000-15,000 g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
- 加入0.8 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000-15,000 g室温离心1分钟,弃收集管中穿透液。
- 12,000-15,000 g室温离心半分钟。
- 在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100 uL通用洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的1.5 mL离心管中,室温放置2分钟。
- 12,000-15,000 g室温离心1分钟,离心管中收集的样品即为RNA。
- RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应,也可放-80℃长期保存。
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相关资料 | 常见人类疾病相关RNA病毒 病毒 | 简称 | 疾病名称 | 类型 | 长度(Kb) | Measles virus | MV | measles | ssRNA | 4.5~85 | Hepatitis A Virus | HAV | hepatitis type A | ssRNA | 7.5 | Poliomyelitis virus | PV | polio | ssRNA | 7.8 | Rubella virus | RV | German measles | ssRNA | 7.9 | Hepatitis C Virus | HCV | hepatitis type C | ssRNA | 9.3~9.4 | Human immunodeficiency virus | HIV | AIDS | ssRNA | 9.7 | Dengue Virus | DV | dengue | ssRNA | 11 | Yellow fever virus | YFV | yellow fever . | ssRNA | 11 | Rabies virus | RV | rabies | ssRNA | 11.9 | Influenza A virus | IAV | influenza | ssRNA | 13.5 | Mumps virus | MuV | mumps | ssRNA | 15.4 | Ebola virus | EBV | virus hemorrhagic fever | ssRNA | 19 |
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疑难解答 | Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难? A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存,每个病毒zui多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子,每种RNA有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的量往往比一个细胞中核酸的量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR或RT-PCR检测,而PCR或RT-PCR的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。 |
关联产品 | 柱式病毒DNAOUT(CAT#:70701-50) |