导致ELISA测定过失的三大要素
时间:2017-10-31 阅读:899
导致ELISA测定过失的三大要素
导致ELISA测定过失作用的要素主要有三大要素:标本要素;试剂要素;操作要素。
ELISA试剂盒的基本原理使抗原(或抗体)结合到某种固相载体外表,并坚持其免疫活性;使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),并且此酶标抗原(或抗体)既保存其免疫活性,又保存其酶活性;测守时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同进程与固相载体外表的抗原或抗体进行反响。
再用洗刷办法使固相载体上构成的抗原抗体复合物与其它物质分隔,毕竟结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成必定份额;再参加酶反响底物后,底物被酶催化后变为有色产品,根据其色彩反响的深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA试剂盒办法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但elisa试剂盒测定中影响要素较多,并且其操作中有必定的技能恳求,在临床查验中除正常反响外,有时常可见到一些过失作用(即假阳性或假阴性作用)。
血清是zui常用的ELISA标本,血浆一般可视为与血清对等的标本,标本导致的假阳性和假阴性作用主要是干扰性物质所构成的,分为内源性物质和外源性物质两种:
1、内源性物质
有人以为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响查看作用。多见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s)抗体、穿插反响物质和其它物质等。
2、外源性物质
外源性物质常常是因为用于ELISA试剂盒的测定血标本的收集、储存等不妥所构成的。如标本溶血、标本被细菌污染、标本储存过久、标本凝聚不全和采血管中添加物等影响。