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探讨酶标仪荧光检测模式

时间:2016-04-05      阅读:2239

基于酶标仪荧光光路的荧光偏振在检测光路上需要起偏器、偏振片,而单色器(光栅)系统是无法添加这样的光学元件的,因此,只有滤光片系统可以完成荧光偏振的检测。
带宽:与吸收光模式不同,荧光染料的发射光都很强,其他成分的干扰很小,因此能否透过更多的光也是决定仪器灵敏的因素。在染料的激发和发射峰形上能截取到更大的峰面积也成为必要条件。单色器的带宽通常是固定的 16nm ,比较窄,滤光片 5-100nm 可选的带宽是强过单色器的,根据滤光片对荧光染料的波长特异性,使用相应的滤光片则代表着使用了适宜的带宽,在保证特异性的前提下大化的提高检测灵敏度。灵敏度的提高同时也意味着试剂的节省,因为要达到同样效果可以采用更少的实验体系。
所以,荧光检测模式的佳光路选择是卤钨灯 + 滤光片系统。但是,如果您是从事研发,或者是特殊的实验要求,比如是开发荧光染料,需要通过荧光光谱扫描来确认染料的激发或发射峰的位置,则需要使用卤钨灯 / 高能氙灯 + 单色器(光栅)系统。
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