猴ELISA试剂盒清洁的几个步骤和关键因素
时间:2020-02-13 阅读:147
猴ELISA试剂盒的清洁关键:
1. 洗板
① 保证洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后在吸水纸(选择洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干;
② 合理安排,或多用几台洗板机。
2. 读板
应保证酶标板清洁,在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能完结ELISA技术规范自动化,有用前进技术质量。
3. 加样
① 标本为血清:将血液先天然寄存1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本搜集管,采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内技术,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
② 加样后及时放入孵箱。
③ 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
④ 如果选用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
⑤ 标本较多时,请分批操作。
只有清洁还不够,要完结一项漂亮的ELISA实验,不但要做足实验的准备,还要熟练掌握操作方法及技巧,后便是实验的成果了。那么猴ELISA试剂盒实验的成果怎么判别剖析呢?
1.仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2.以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的IFN-Y标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的IFN-Y含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;
或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
3.技术值范围:0-400pg/ml
4.敏感度:1.0pg/ml
ELISA的实验成果可用肉眼观察颜色反应的深浅作出判别,也可用分光光度计作测定。当然,后者更为正确。而肉眼观察更为简洁,而且也有必定正确性。据Adler(1980)报告,目测为±1+、2+、3+、4+相当于分光光度计测定O.D值。
不管用哪种方法判定成果,每次都要有阳性和阴性参考血清作对照,这样可以消除一些外界的影响要素。