凝胶成像 经典知识剖析(一)
时间:2022-05-12 阅读:1810
那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下凝胶成像 ,经典知识剖析(一):
凝胶成像即对DNA或RNA胶进行切胶、拍照、观察、分析的实验室类仪器,凝胶成像系统可以应用于分子量计算、密度扫描、密度定量、PCR定量等生物工程常规研究。凝胶成像系统的基本骨架包含:CCD相机,暗室和分析软件。系统提供白光和紫外光以及蓝光光源进行拍摄凝胶,由系统自带的图像捕捉软件捕捉拍摄图像,然后由系统自带的图像分析软件对拍摄的图像进行分析。
① 原理
样品中各组分在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。
样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度,通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用*新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀,*大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。
②种 类
1、普通凝胶成像分析系统:可以对蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸监测;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。(或UV,EB和有色及可见样品成像);
2、化学发光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、紫外-荧光、有色及可见样品成像;
3、多色荧光成像分析系统:成像范围涵盖UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品;
4、多功能活体成像分析系统:UV,EB,化学发光、多色荧光荧光、有色及可见样品成像和离体组织和小型动物,及大型型动物。
③ 特 点
自动对焦
自动对焦(Auto Focus)凝胶成像分析系统,解决了新手在拍摄凝胶照片过成中,经常发生的被拍摄照片的亮度和对比度,焦距不准使照片不清晰的问题。利用物体光反射的原理,将反射的光被相机上的传感器CCD接受,通过计算机处理,带动电动对焦装置进行对焦的方式叫自动对焦.它多分为二类:一是主动式,另一个则是被动式。
a、主动式自动对焦:相机CCD上的红外线发生器、超声波发生器发出红外光或超声波到被摄体。相机CCD上的接受器接受反射回来的红外光或超声波进行对焦,其光学原理类似三角测距对焦法,广泛用于各种平视取景相机.主动式对焦对斜面,光滑面对焦困难.对亮度大,远距离的被摄体对焦困难.这是由于发出的光被反射到其它方向,或达不到被摄体所至.主动式由于是相机主动发出光或波,所以可以在低反差、弱光线下对焦.对细线条的被摄体,对动体都能自动对焦.缺点是当被摄体能吸收光或波时对焦困难,还会被玻璃反射故透过玻璃对焦困难。
b、 被动式自动对焦:即直接接收分析来自景物自身的反光,进行自动对焦的方式.这种自动对焦方式的优点是;自身不要发射系统。对具有一定亮度的被摄体能理想的自动对焦,在逆光下也能良好的对焦.对远处亮度大的物体能自动对焦。但缺点是对细线条的被摄体自动对焦较困难.在低反差,弱光下的对焦困难.对动体自动对焦能力差.对含偏光的被摄体自动对焦能力差.黑色物体或镜面的对焦能力差。主动、被动式自动对焦方式各有千秋,好在我们开创的凝胶成像自动对焦拍摄系统上有二种自动对焦方式,可以互补使用,自动切换,发挥其强项,克服其弱点。
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