色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。使用的时候选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

 

　　ultra液相色谱柱保护柱的使用注意事项

 

　　保护柱位于进样器与分析柱之间，作用主要两方面：截留不溶性颗粒、吸附样品基质中的杂质。

 

　　以下几种情况建议使用保护柱：

 

　　1.中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重，梯度洗脱时影响更大。

 

　　2.生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染，保护柱可先于分析柱承受这种污染，从而延长分析柱寿命。

 

　　保护柱很重要，但选择合适的保护柱更重要，选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。

 

　　ultra液相色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度20um时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20um时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：

 

　　①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；

 

　　②径向加压法，Waters；

 

　　③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；

 

　　④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。