出口禽肉中莫能菌素残留量检验方法 生物自显影法 SN 0296一93
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2216次中华人民共和国进出口商品检验行业标准 中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口禽肉中莫能菌素残留量检验方法
生物自显影法 SN 0296一93
Method for the determination of monensin
residues in poultry meat for export
?Bioautography method
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1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口禽肉中莫能菌素残留量的抽样、制样和生物自显影测定法。
本标准适用于出口冻鸡中莫能菌素残留量的检验。
2 抽样和制样
2.1 检验批
以不超过2500件商品为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量
批量,件 zui低抽样数,件
1~25 1
26~100 5
101~250 10
251~500 15
501~1000 17
1001~2500 20
2.3 抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取一袋作为原始样品,原始样
品总量不少于2kg,放入清洁容器内,加封后标明标记,及时送交实验室。
2.4 样品制备
从每袋原始样品中取出部分有代表性样品,将可食部分放入高速组织捣碎机中捣碎均
匀,充分混匀,用四分法缩分出不少于1kg试样。装入清洁容器内,加封后标明标记。
2.5 样品保存
将试样于?18℃冷冻保存。
注:在抽样及制样过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3 测定方法
3.1 方法提要
用甲醇提取肉样中莫能菌素,经四氯化碳萃取后浓缩至干,以甲醇溶解残留物,用薄
层分离,再用生物自显影法测定。
3.2 设备和材料
3.2.1 微量注射器:50 μL。
3.2.2 薄层板:硅胶,Q/YT 257?85SG,5cm×20cm,使用前110℃活化2h。
3.2.3 展开缸:240mm×57mm×32mm。
3.2.4 游标卡尺:测量范围0~200mm,精度0.02mm或使用抑菌圈测量仪测量。
3.2.5 离心机:转速3000 r/min。
3.2.6 旋转浓缩器。
3.2.7 恒温培养箱:37±1℃。
3.2.8 高压灭菌器。
3.2.9 长方形培养皿:20cm×10cm×5cm。
3.2.10 均质器:带均质杯250mL。
3.3 试剂和培养基
3.3.1 试剂
3.3.1.1 甲醇:分析纯。
3.3.1.2 四氯化碳:分析纯。
3.3.1.3 乙酸乙酯: 分析纯。
3.3.1.4 莫能菌素标准品: 960μg(效价)/mg(中国兽药监察所提供)。
3.3.1.5 试验菌种:枯草杆菌(Bacillus subtilis), 菌种号ATCC 6633(卫生部药品生物
制品检定所提供)。
3.3.2 培养基
3.3.2.1 菌种用培养基(见附录A 第A1章)。
3.3.2.2 生物自显影用培养基(见附录A第A2章)。
3.3.2.3 肉汤培养基(见附录A第A3章)。
3.4 测定步骤
3.4.1 工作液制备
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