维生素C是一种水溶性维生素，是人体必需营养素，严重缺乏会导致坏血病，因此它又被称为抗坏血酸。人体无法对维生素C进行合成，只能通过食物摄取。婴幼儿配方奶粉中的维生素对婴幼儿的健康成长尤为重要，尤其对无法进行母乳喂养、将配方奶粉作为主要营养来源的婴儿而言。

本文对乳粉中维生素C的液相色谱法进行研究，对样品的提取溶液进行比较筛选，对去除蛋白、脂肪的净化分离条件进行优化，从而建立简便、有效可行的分析方法，适用于日常乳粉中维生素C的检测，同时本文对pH值影响维生素C溶液稳定性进行深入探讨。

1材料与方法

1．1材料与试剂

抗坏血酸标准品(纯度大于99%)Sigma公司;二硫苏糖醇(纯度大于99%)Sigma公司;甲醇(色谱纯) ;正己烷、磷酸二氢钾、偏磷酸、乙酸(分析纯);超纯水(由Mill－Q纯水器系统制得)。

1．2仪器与设备

液相色谱仪(配有岛津LC20AD泵，SIL20AC自动进样器，SPDM20A二 极 管 阵 列 检 测 器、LCsolution色 谱 工 作站) ;超声波水浴;高速冷冻离心机(德国Sigma公司) ;涡旋振荡器(德国Heidolph公司) ;水平往复振荡器(德国IKA公司)。

1．3标准工作液的配制

精 密 称 取50mg(精 确 到0．1mg)抗坏血酸标准品于100ml容量瓶中，以3%偏磷酸水溶液定容至刻度，配成标准贮备溶液浓度为500mg/L。置于4°C冰箱避光保存，保存期1个月。临用前用3%偏磷酸水溶液将标准贮备溶液逐级稀释得到的 浓 度 为0．5mg/L、1．0mg/L、2．0mg/L、5．0mg/L、10mg/L的标准工作溶液。

1．4色谱条件

色谱柱:AgilentTC－C18色谱柱，(250×4．6mm，5μm) ;流 动 相:0．05mol/L磷 酸 二 氢 钾(pH=2．5) ;流 速:1．0ml/min;柱温:35°C;进样量:10μl;检测波长:240nm。

1．5样品处理

称取1．0g试样于50ml具塞塑料离心管中，加入1．0ml20mg/ml二硫苏糖醇，置暗处反应半小时，取出加入3%偏磷酸水溶液溶解并定容至10ml，涡旋混匀1min，置水平往复振荡器上振荡或超声波水浴中超声提取10min，取出，加入5ml正己烷涡旋混匀30s，以不低于4000r/min离心5min，下层水相过0．45μm水相滤膜后，供液相色谱测定。

2结果与讨论

2．1标准溶液稳定性

维生素C的标准工作液(10mg/L)在pH＜2的偏磷酸溶液和pH=2的1%乙酸溶液中6h之 内 稳 定，几 乎 不 降 解，24h后测定分别降低8%和26%，;在pH=3水 溶 液 中6h降 解32%，24h后 测 定 降 解94%;pH=4和pH=6溶液中2h分别降解52%和58%，24h后测定均降解100%。

2．2提取溶液的选择

本方法选择3%偏磷酸溶液作为提取溶剂。

2．3色谱条件的优化

采用AgilentTC－C18分析维生素C标准品的液相色谱图见图1。

用不含维生素C的乳粉样品进行添加回收和精密度实验，样品空白和样品添加的色谱图见图2～图3，乳粉中添加维生素C的回收率和精密度实验结果见表1。

婴幼儿乳粉测定维生素C的测定结果如表2.