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内皮细胞培养基的详细配方

时间:2024-10-11      阅读:124

内皮细胞培养基的配方通常包括基础培养基和特定的补充成分。以下是一个常用的内皮细胞培养基配方示例:  
基础培养基  
Dulbecco'sModifiedEagleMedium(DMEM)或RPMI1640  
选择合适的基础培养基,DMEM比较常用。  
补充成分  
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)  
最终浓度:10%(v/v)  
青霉素-链霉素溶液(Penicillin-Streptomycin)  
最终浓度:100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素。  
内皮生长因子(EndothelialGrowthFactor,EGF)  
最终浓度:10-20ng/mL。  
血管内皮生长因子(VascularEndothelialGrowthFactor,VEGF)  
最终浓度:10-50ng/mL。  
转化生长因子β(TransformingGrowthFactor-beta,TGF-β)  
最终浓度:1-10ng/mL(可选)。  
其他添加剂(可根据需要选择):  
生长因子(如FGF,基本成纤维生长因子)、胰岛素、氨基酸等。  
配制步骤  
准备基础培养基:根据需要取适量的DMEM或RPMI1640。  
添加胎牛血清:加入FBS,轻轻混合均匀。  
添加抗生素:加入青霉素-链霉素溶液,混合均匀。  
添加生长因子:按照上述浓度分别添加EGF、VEGF、TGF-β等生长因子。  
调节pH:确保培养基的pH在7.2-7.4之间,可以使用盐酸或氢氧化钠进行调节。  
过滤灭菌:使用0.22μm过滤器进行灭菌,以去除微生物。  
存储条件  
配制好的培养基应存放在4°C冰箱中,避免反复冻融,建议使用时分装。  
请根据实验需要调整成分及其浓度,并遵循相关的操作规程和安全指南。
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