产品介绍：

　本品是由一款新型高效的快速DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。本产品为康为世纪新型快速DNA聚合酶，具有*的扩增速度与稳定性，延伸速度可达5 s/kb，最短十五分钟完成PCR，长片段（大于3 kb）或者复杂模板可以采用10-30 s/kb的延伸速度或者较多循环数。MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，同时复杂模板也能得到有效扩增，超过98%的PCR扩增能一次成功。使用时只需要加入DNA模板和引物，补足水即可反应，可最大限度地减少人为误差、降低污染和节约时间。

  本产品已加入染料（蓝色），反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的PCR产物3′端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆，并适用于康为无缝克隆试剂盒（CW3034）、T4连接试剂盒（CW0805）和感受态产品（CW0812）。

 本产品主要适用于超快PCR、复杂模板、复杂二级结构、对高保真性有要求的基因克隆等实验和大规模基因检测。

产品名称：康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混

产品货号：CW3009H

质量控制：

　经检验无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用说明：

　以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

实验设定：

1.模板DNA量设定：

模板过量可能导致非特异性扩增或smear。50 μl PCR反应体系中模板DNA推荐使

用量如下：

-人基因组DNA 5 ng-500 ng

-大肠杆菌基因组DNA 50 pg-100 ng

-质粒DNA 10 pg-1 ng

2.引物浓度设定：

引物浓度可设为0.1 μM-1.0 μM之间。引物浓度过低时可能导致扩增产物少。引物浓度过高会抑制特异性扩增，可能导致非特异性扩增。

3.退火温度设定：

一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率

时可适当降低退火温度；发生非特异性反应时可适当提高退火温度。对于复杂模

板，需要调节退火温度实现高效扩增。

4.延伸时间设定：

延伸时间应根据所扩增片段大小设定。以下为推荐的延伸时间：

质粒等简单模板：5-15 s/kb；

常规基因组、cDNA模板：10-15 s/kb；

复杂模板、粗提模板：20-30 s/kb；

（延伸时间不宜过短应至少在5 s/kb以上，也不宜超过30 s/kb）。

5.循环数设定：

可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果

循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前

提下应尽量减少循环次数。

保存条件：-20℃

产品订购信息：

品牌             货号                   名称                               规格

康为世纪 CW3009H  2×Flash PCR MasterMix(Dye)    40 ml

产品名称：康为世纪 2×Flash MasterMix含染料PCR预混

产品货号：CW3009H

关于公司：

康为世纪是主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产，为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。康为世纪建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台，构建成了公司完整的研发创新体系。

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红荣微再作为RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子诊断专业供应商，以“传递科学价值，服务科学研究"为宗旨,努力为客户提供质量可靠、货美价优的分子诊断试剂耗材，与客户携手为中国分子诊断的发展而前行。