产品介绍：

　本试剂盒适合于从新鲜或冷冻的动物组织、细胞、血液、细菌等多种样品中提取高纯度总DNA。本品可纯化获得分子量最大为50 kb的核酸片段，纯化过程不需使用苯酚或氯仿等有毒溶剂，无需乙醇沉淀。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

产品名称：康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒

产品货号：CW2298M

产品组份：

自备试剂：

无水乙醇

Enzymatic Lysis Buffer（提取革兰氏阳性菌基因组DNA时须准备）。

Enzymatic Lysis Buffe配方：20 mM Tris，pH8.0；2 mM Na2-EDTA；1.2% Triton

X-100；终浓度为20 mg/ml的Lysozyme（溶菌酶）。

产品特点：

●简单方便:提取速度快，仅需40分钟即可完成基因组DNA提取。

●高纯度:纯化得到的DNA ODSen.s.比值在1.7-1.9之间，完整度高(>15 kb)，可用于二代测序、定量PCR、芯片检测等下游实验。

●高通量:可与液体工作站、磁珠法自动纯化系统匹配使用。

实验前准备及重要注意事项:

1．向Proteinase K中加入用量的Proteinase K Storage Buffer使其溶解，-20℃保存。配制好的Proteinase K勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。

2．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的核酸片段较小且提取量下降。

3．如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组，建议在对数生长期早期收集样品。

4．第一次使用前应按试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

5．使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。

6．如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-Free的RNase A（100 mg/ml）

操作步骤:

血液及细胞样本基因组提取

1．材料处理

1a. 如果提取材料为哺乳动物抗凝血液（无核红细胞），可直接向50-200 μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品中加入Buffer GTL补足至200 μl；

1b. 如果提取材料为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，取5-10 μl新鲜或冷冻的抗凝血液样品，加入Buffer GTL补足至200 μl；

1c.贴壁培养的细胞应先处理为细胞悬液（最大提取量为5×106个细胞），2,000rpm（400×g）离心5分钟，弃尽上清，加200 μl GTL，振荡至样品*悬浮；

2．加入20 μl Proteinase K。

3．加入200 μl Buffer GL，涡旋震荡充分混匀，56℃水浴10分钟。

4．短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入200 μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。短暂离心。

5．上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns DM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12,000 rpm（～13,400 ×g） 离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

6．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rp离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

7．向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

8．12,000 rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以*晾干。

9．将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200 μlBuffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12,000 rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

保存条件：室温（15-30℃）

产品订购信息：

品牌             货号                   名称                                     规格

康为世纪  CW2298M    Universal Genomic DNA Kit     200preps

产品名称：康为世纪 柱式基因组DNA提取试剂盒

产品货号：CW2298M

关于公司：

康为世纪是主要从事高附加值、高技术含量的生物试剂的研发与生产，为生命科学研究、基因检测和体外诊断用户提供创新型生物产品和服务。康为世纪建立了专业化、集约化、能够形成自主知识产权的技术创新体系和开放式的合作创新平台，构建成了公司完整的研发创新体系。产品线主要包括分子诊断原料酶、核酸采集与保护剂、核酸提取试剂盒、分子诊断检测试剂等，打破了中国生物研究与产业对进口试剂的依赖。

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