拟南芥培养箱简单的培养和特殊培养方法
时间：2016-04-11 阅读：5895
拟南芥培养箱简单的培养，可用于基因表达、器官发育、基因突变等研究。
1、首先把拟南芥种子放到滤纸上，用70%酒精进行消毒处理，再用*进行处理（也可选择20%漂白剂以及0.05% Triton X-100 非离子表面活性剂做杀菌处理20分钟）。用无菌水冲洗5遍，然后将种子点到MS培养基上，pH5.9，另加0.9%琼脂以及2%蔗糖。
2、把种子放到4℃黑暗条件下进行春化48h-72h左右，在长日照或短日照条件下催芽，。利用PLC控制器，编辑简单的昼夜模式，设定光照时间16小时（黑暗8小时）或者光照14小时（黑暗10小时）；选配Q23+连续光强调节装置，设定光照强度为100-150umol/m2.s;设定室内温度为光照条件下20-22℃，黑暗条件下18-20℃；选配湿度控制系统，设定室内相对湿度70%。
3、出苗大约7~10天，然后移入土中培养，采用底部灌溉方式浇水（利用土壤的毛细作用）。在*次浇水前，可使土壤*干燥，以后每隔7~10天浇一次水。
4、土壤可用营养土、蛭石以及珍珠岩比例10:1:1的比例配置，也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等进行混合。在生长过程中，可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、当植株长到一定高度时，可剪断茎杆，以产生更多的花序，可用于转化研究或者获得更多的种子。
拟南芥培养箱特殊培养
为了加快拟南芥生长速度，在移入土壤培养后，可设定长日照，利用PLC控制器，编辑程序设定24h光照，光强100-250umol/m2.s，温度持续22-23℃。
拟南芥根系处理培养，可减少光照时间为8-12h，提高光照强度为100-350umol/m2.s，温度为光照条件下22-23℃，黑暗条件下18-20℃，其余培养条件同正常培养。