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做ELISA的经验总结: 1、包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保存抗原很重要，做重组蛋白时，一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。2、加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。 3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。 4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。 5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。在批放行前，每一批酶联免疫试剂都完成37℃热稳定性试验，试验结果符合产品的质量标准，以保证产品的安全性、有效性及质量可控。
