细胞冻存液是用于在低温环境下保存细胞的一种特殊溶液，其主要目的是保护细胞在冷冻和解冻过程中免受损伤。细胞冻存液通常包含渗透性和非渗透性保护剂，如二甲基亚砜（DMSO）和甘油，这些成分可以渗透到细胞内部，降低细胞内外的电解质浓度，防止细胞内水分外渗，从而减少冰晶的形成。

细胞冻存液配置概述

常用的细胞冻存液配比为培养基：血清：DMSO=7:2:1，适用于多数细胞系，能够保证细胞在冻存过程中有较高的存活率。需要长时间保存或者具有特别珍贵性的细胞系调整为血清：DMSO的比例=9:1，这样可以更好地保护细胞，并确保其在冻存后依然保持较好的生物学特性。

不同细胞冻存液配置比例

大部分的细胞其实并不需要20%或者90%的血清，只需用含有10%血清的培养基来配置成含5%DMSO的溶液即可用于细胞冻存，有的甚至都不需要加血清。

冻存液配置的一些注意事项

✔ 选择合适的细胞状态：应选择处于对数生长期且细胞汇合度在80%-90%左右的细胞进行冻存操作，以确保细胞在最佳状态下进行冻存。

✔ 细胞密度：冻存时的细胞密度应适当，推荐密度为3×10^6到1×10^7细胞/mL。细胞密度过低可能会影响存活率。

✔ 避免长时间暴露于常温：细胞悬液加入冻存液后应尽量减少在常温下的放置时间，DMSO在常温下对细胞有较大的损伤。

✔ 使用高质量的冻存管：确保使用无菌、耐低温的冻存管，并在分装时做好标记，以便后续识别。

✔ 血清和DMSO的比例：常用的比例为90%血清+10%DMSO或55%基础培养基+40%血清+5%DMSO，根据具体细胞类型和实验需求进行调整。