维生素 B6 检测试剂盒操作简单，效果好

维生素 B6（Vitamin B6）又称吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在体内以磷酸酯的形式存在，是一种水溶性维生素，肉类、全谷类、蔬菜和坚果类中含量较高。在机体中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢，对生物体具有极其重要的作用。
 

VB6 与 4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物，在 400nm 有特征吸收峰。可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器EP 管、冰和蒸馏水。
 

一、粗酶液提取：
组织：将样品磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加
入 0.6mL 提取液）加入提取液，60℃浸提 30min，加蒸馏水 0.4mL，混匀后于 25℃，16000rpm 离心
10min，取上清测定（动物组织及其他蛋白含量较高的样本建议离心 20-30 分钟或反复离心 2-3 次至
上清无混浊）。
 

细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加
入 0.6mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；加蒸
馏水 0.4mL，混匀后于 25℃，16000rpm 离心 10min，取上清测定。
 

液体：直接检测。
 

二、测定步骤：
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。
2、将 10mg/mL（10000μg/mL）标准液用试剂一稀释为 500、250、125、62.5、31.2515.625 μg/mL的标准溶液备用。

三、维生素 B6 含量计算：
1、 标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为 x 轴，其对应的△A 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程 y=kx+b，将△A 带入方程得到 x（μg/mL）
2、 维生素 B6 含量的计算：
（1）按蛋白浓度计算
VB6（μg prot）= x×V 提取÷（V 提取×Crp）= x÷Cpr
（2）按样本质量计算
VB6（μg/g 鲜重）= x×V 提取÷W=x÷W
（3）按照细胞数量计算
VB6（μg/104 cell）= x×V 提取÷细胞数量（万个）=x÷细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
VB6（μg/mL）= x×V 提取÷V 提取= x
V 提取：提取液体积，1mL； V 样：加入的样品体积，0.04mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；
W：样本质量，g。
1、 A 大于 1.2 时，建议将样品用试剂一稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2、 蛋白浓度较高的样品，比如动物组织、豆类种子等，若显色完成后有沉淀产生，将样本稀释后再测定，在计算公式中乘以稀释倍数。
3、 显色完成后立即进行测定，尽量保证反应时间一致。

注意：

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。

2. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和kou罩操作。