阿利新蓝染色实验代测介绍：

在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中，常需联合使用多种染料以显示其组织学结构。其中，起源于上世纪60年代的番红O（safranin O）-固绿（fast green）染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的结构而备受青睐。

番红固绿染色实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2、番红染色：切片入1%番红染液染色1-2h。自来水稍洗，洗去多余染料。

3、脱色：入50%，70%，80%梯度酒精脱色各5-10s。

4、固绿染色：切片入0.5%固绿染液中染色5-10s。无水乙醇I中脱色30s，无水乙醇II中脱色1min。

5、封片：切片于60℃烤箱烤干后于二甲苯透明5min，中性树胶封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

阿利新蓝染色实验代测注意事项：

1、片子染色不好需要重新染色时，可以用自来水浸泡去除固绿颜色，盐酸酒精浸泡去除番红颜色。
2、番红鲜红色除了软骨外其他有些地方的红色也较深。一旦番红着色深后再染固绿染不上，需进将番红红色全部脱掉后重新染方可。
3、染色时间稍有差异红色和绿色的差异就会很大，要注意镜下控制两种颜色的程度。
4、番红染次数多了会产生沉淀且不易着色，需及时更换染液。

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