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C18液相色谱柱的维护详解

时间:2019-09-26      阅读:2437

C18液相色谱柱是一种的分析手段,液相色谱柱是色谱分析系统的“心脏”,由于被分析样品种类繁多,加之样品基质复杂,色谱柱极易被强保留物质污染。这些强保留物质通常难以洗脱,多次上样后,聚集在柱头端,堵塞筛板,甚至可能与填料发生相互作用导致填料变性,这会导致柱效下降,分离度降低和峰型异常等现象。因而液相色谱柱的维护是十分必要的。
 
C18液相色谱柱的维护详解:
1.色谱柱的平衡
反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得较大的"补偿",而且色谱柱的寿命也会变得更长!操作步骤:
a.平衡开始时将流速缓慢地提高,用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂流速如果较低,则需要较长的时间来平衡)
b.如果使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。
 
2.色谱柱的再生
长期使用的色谱柱,往往柱效会下降(柱子的理论塔板数减低)。可以对色谱柱进行再生,在有条件的实验室应使用一个廉价的泵进行柱子的再生。
 
C18液相色谱柱具有的性能。即使对于非常难分离的碱性化合物,也可获得出色的峰形,从而改善了这些类型的样品的柱效和分离度。由于在硅胶制造和键合技术方面进行了改进,因此能够获得这样优异的性能,并且这些技术*由安捷伦控制。
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